Expresión de genes asociados a la formación de biofilms de Listeria expuestos a la acción de bacteriocinas producidas por Latilactobacillus curvatus

MELIAN, CONSTANZA; SEGLI, FRANCO; PLOPER, DIEGO; VIGNOLO, GRACIELA, .; MENDOZA, LUCIA; CASTELLANO, PATRICIA

Còrdoba

Congreso; VIII Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de los alimentos; 2022

MINCYT

Listeria monocytogenes es un patógeno causante de infecciones transmitidas por alimentos de elevada mortalidad que representa una gran preocupación en la industria debido a su capacidad para sobrevivir en condiciones adversas. Algunas cepas de L. monocytogenes son capaces de formar biofilm lo que facilita su persistencia en entornos de procesamiento de alimentos como fuente crónica de contaminación. En estas comunidades las bacterias adquieren mayor resistencia a los desinfectantes habitualmente empleados. Debido a esto, actualmente se busca implementar estrategias naturales y efectivas para controlar los biofilms como ser el uso de bacterias lácticas y/o sus metabolitos (bacteriocinas). En este sentido, el objetivo de este trabajo fue evaluar la transcripción de diferentes genes implicados en la formación de biopelículas de L. monocytogenes en presencia y ausencia de bacteriocinas producidas por Latilactobacillus curvatus CRL705 y CRL1579 (AL705) a 10 °C. Las cepas de L. monocytogenes FBUNT, Scott A y CECT 4031T fueron capaces de formar biofilms en las condiciones ensayadas. En presencia de concentraciones subinhibitorias de bacteriocinas (10 y 20 UA/ml), se observaron reducciones de un 50% en la formación de biopelículas mediante tinción violeta y microscopía de láser confocal. Además, las bacteriocinas disminuyeron la motilidad de los patógenos siendo las cepas FBUNT y Scott A las más afectadas. Treinta genes relacionados con la formación de biofilm, adhesión, virulencia y respuesta al estrés, se evaluaron mediante PCR y RT-qPCR. Entre los genes analizados, 24, 25 y 30 fueron amplificados por PCR, mientras que de ellos solo 14, 17 y 24 fueron detectados por RT-PCR en FBUNT, Scott A y CECT 4031T, respectivamente. En L. monocytogenes FBUNT no se expresaron numerosos genes relacionados con el desarrollo de biofilms (internalinas, sortasas y proteínas de superficie celular), mientras que éstos si fueron transcriptos en las cepas Scott A y CECT 4031T. En presencia o ausencia de las bacteriocinas, los cambios en la transcripción de genes fueron cepa dependiente. Además, se observó una regulación génica similar en presencia de ambas bacteriocinas y dependiente de la concentración ensayada. La adición de AL705 incremento la expresión de los genes luxS, agrA, agrB, cspB y proteínas de la superficie celular en las tres cepas de Listeria mientras que no se detectó la expresión del factor regulador positivo A (prfA). Por otro lado, AL705 produjo un aumento en la transcripción del gen sigB en las 3 cepas, mientras que disminuyo la transcripción del gen actA en Scott A y CECT 4031T. También, se encontró un aumento en la expresión de genes relacionados con la producción de energía y transporte de azúcar en presencia de la bacteriocina. Con estos resultados, se puede lograr una mejor comprensión del modo en que las bacteriocinas ejercerían el control de la formación de biopelículas de cepas de L. monocytogenes en superficies abióticas a 10 °C. Las bacteriocinas podrían representar una exitosa estrategia para mitigar la contaminación mediada por biofilms de Listeria durante el procesamiento de alimentos.