Estudio de la inactivación microbiana por luz UV-C mediante citometria de flujo

SCHENK, M.; RAFFELLINI, S; GUERRERO, S N; ALZAMORA, STELLA MARIS

Concordia

Congreso; XII Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de Alimentos; 2009

AATA

La citometría de flujo es una herramienta poderosa para analizar grandes poblaciones de células en tiempos breves y proveer información sobre distintos aspectos de la fisiología celular. Se analizó mediante citometría de flujo el daño causado a distintas especies de microorganismos tratadas con radiación ultravioleta. Para visualizar mediante esta técnica los daños causados por el tratamiento, se utilizaron dos fluorocromos, Fluoresceína diacetato (FDA) e ioduro de propidio (IP). Los microorganismos expuestos al tratamiento con diferentes dosis de radiación ultravioleta de onda corta fueron Saccharomyces cerevisiae, Listeria innocua y Escherichia coli. Los resultados obtenidos indicaron que los mecanismos de daño celular difieren según el tiempo de exposición a la radiación ultravioleta y el microorganismo ensayado. En general las curvas de inactivación obtenidas por recuento en placa no se correlacionaron a los distintos tiempos con la fracción de células teñidas con IP. La citometría de flujo permitió además detectar en Listeria innocua subpoblaciones de microorganismos viables (que mantienen actividad metabólica) pero no cultivables (por ruptura de membrana), no detectables mediante las técnicas de recuento en placa habitualmente empleadas para evaluar la inactivación de microorganismos. Por consiguiente, la citometría de flujo constituye una herramienta analítica complementaria útil para aumentar el conocimiento de los mecanismos de inactivación e identificar tratamientos/dosis que podrían significar un riesgo microbiológico si ocurriera recuperación de la fracción viable/no cultivable.