ESTUDIO DEL EFECTO PROTECTOR DE UN SIMBIÓTICO (BACTERIAS LÁCTICAS + GALACTOLIGOSACARIDOS) Y ZINC SOBRE LA ACCIÓN DE E. coli enterohemorrágica EN CÉLULAS VERO

GERBINO,E,; TYMCZYSZYN,E.E; GÓMEZ-ZAVAGLIA, A; HUGO, A. A.

Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de los Alimentos. CYTAL 2015; 2015

Asociación Argentina de Tecnólogos Alimentarios

Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) está asociada a brotes de diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). Numerosos factores de virulencia han sido caracterizados en las cepas de EHEC siendo muy importante la toxina Shiga. En este sentido los probióticos son bien conocidos por su impacto positivo en la salud intestinal, la estimulación de la respuesta inmunitaria y la protección contra patógenos como EHEC. Dado que tanto el zinc como los probióticos tienen efectos beneficiosos sobre el estado nutricional e inmunológico del huésped, su efecto conjunto podría ser amplificado.Los prebióticos han sido definidos como ingredientes alimenticios no digeribles que estimulan selectivamente la proliferación y/o actividad de poblaciones bacterianas benéficas del tracto gastrointestinal del huésped. Entre los compuestos con propiedades prebióticas, los galactooligosacáridos (GOS) son los que muestran mayores resultados.Algunos trabajos se centran en el uso de probióticos y zinc o prebióticos y zinc como opciones terapéuticas para la diarrea o incluso el HIV. Sin embargo, en ninguno de los casos se estudió el efecto combinado del zinc con una mezcla simbiótica de probióticos y prebióticos. Es por todo lo mencionado, que el objetivo general del presente trabajo fue evaluar las propiedades biológicas de un simbiótico (bacterias lácticas y galactooligosacaridos) y zinc frente a EHEC in vitro. Las bacterias lácticas L. plantarum CIDCA 83114 y L. kefir CIDCA 8348 fueron crecidas en caldo MRS a 37 y 30 C respectivamente, durante 48 hs. Escherichia coli 69160 (EHEC) se cultivó en caldo TSB durante 16 hs. a 37 C y sus sobrenadantes se obtuvieron previa centrifugación (6000 rpm, 10 min.) mediante filtración con membrana de 0.45 m. Los GOS VIVINAL SYRUP que contiene un 59 % (p/v) de GOS se emplearon en una concentración del 2% (p/v) y soluciones de sulfato de zinc 1 mM. Se utilizaron células Vero como modelo de citotoxicidad de toxina Shiga. Las mismas se crecieron hasta confluencia en medio DMEM a 37ºC en atmósfera con 5% de CO2. Las monocapas fueron preincubadas durante una hora con distintas combinaciones de bacterias lácticas, GOS y Zn. Luego se añadió el sobrenadante del cultivo de EHEC y se incubó durante 48h. El efecto biológico de la toxina Shiga se evaluó mediante desprendimiento celular por tinción con cristal violeta y liberación de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH). Se determinó que la concentración de toxina óptima para evaluar un efecto protector osciló entre 1/500 y 1/1000 con un desprendimiento celular entre un 82 y 34 % respectivamente. Al preincubarse las monocapas con GOS el desprendimiento celular disminuyo un 10 % respecto a la toxina. En el caso de las distintas combinaciones de L. plantarum 83114 y L. kefir 8348 con GOS, se observó que la mezcla de bacteria + GOS produjo un 40 % menos de desprendimiento celular. El agregado de zinc al simbiótico no modifico significativamente los porcentajes de desprendimiento observados en la mezcla bacteria con GOS. Los valores obtenidos a través de la enzima lactato deshidrogenasa se correlacionaron con los de cristal violeta.Los resultados de este trabajo muestran un efecto protector de la mezcla simbiótico con zinc frente a la acción de la toxina Shiga E. coli enterohemorrágica a diferencia de cada una de ellas por separado.