INVESTIGADORES
PEREZ Oscar Edgardo
congresos y reuniones científicas
Título:
Transcitosis de vesículas extracelulares producidas por la cepa probiótica Bacillus subtilis 168 en un modelo in vitro de barrera intestinal
Autor/es:
ANA PAULA DOMÍNGUEZ RUBIO; JIMENA HEBE MARTÍNEZ; MARCOS PALAVECINO; MARIANA PIURI; OSCAR E PÉREZ
Lugar:
Quilmes, Prov. de Buenos Aires
Reunión:
Encuentro; 3ª Reunión de Jóvenes Investigadores de Ciencia y Tecnología; 2018
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Quilmes
Resumen:
Dentro de los alimentos funcionales, los probióticos cobran relevancia en el marcode la comunicación interreino procariotas-eucariotas, aunque, los mecanismos por los cuales la microbiota gastrointestinal influye en el hospedador siguen sin estar claros. Las vesículas extracelulares (VEs) son una forma de comunicación extracelular y se les ha atribuido participación en la comunicación interreino. Las VEs de las bacterias Gram-positivas se encuentran en la nanoescala (30-300 nm) y contienen DNA, RNA y proteínas. Nuestra hipótesis es que las VEs tienen la capacidad de atravesar el epitelio intestinal y llegar al torrente sanguíneo del hospedador, y así a sus órganos y tejidos blancos.Se estudió la capacidad de las VEs producidas por B. subtilis 168 de atravesar células epiteliales intestinales humanas en monocapa. B. subtilis 168 se cultivó en medio BHI a 37ºC bajo agitación durante 18 hs, se aislaron sus VEs por ultracentrifugación y se marcaron con éster de succinimidil-carboxifluoresceína. Se estudió la internalización de VEs mediante el número de VEs dentro de las células diferenciadas a su forma enterocítica mediante Microscopía Confocal (MC). Además, se estudió la transcitosis de las VEs por la fluorescencia medida en el medio recogido de la cámara inferior del transwell y su análisis por MC.Se observaron VEs intactas en el interior de células Caco-2 a partir de los 5 min, con un máximo a los 120 min. En los estudios de transcitosis, la fluorescencia se registró después de transcurridos 120 min, aumentó 50% a los 240 min y se observaron VEs intactas por MC.Las VEs podrían desempeñar un papel clave en la señalización entre las bacterias de la microbiota con el hospedador y serían cruciales en el desarrollo de alimentos funcionales diseñados, ya que, podrían ser utilizadas como sistema de delivery de microRNA, proteínas y/o antígenos.