Evaluación del efecto inmunomodulador de ingredientes funcionales obtenidos a partir de co-productos agroalimentarios en la línea celular HT-29 reportera del factor de transcripción NFƙb

ROSSI YANINA; PERELMUTER K; BOLLATI-FOGOLÍN M; BETTIOL MARINA DEL ROSARIO; BODOIRA ROMINA; DAMIÁN MAESTRI; MARIANA MONTENEGRO

Buenos Aires

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de Alimentos; 2023

Asociación Argentina de Tecnologos alimentarios

La creciente demanda yproducción de nuevos alimentos con mayores beneficios sobre la salud de losconsumidores ha llevado a la industria alimentaria a la producción de aditivosbioactivos que potencien su funcionalidad. La incorporación de agentesbioactivos (ABs),como son las sustancias antioxidantes y anti-inflamatorias, en sistemasalimentarios se muestra como una alternativa interesante para el desarrollo dealimentos funcionales, lo cual contempla la evaluación de la actividadbiológica en ensayos in vitro paraobtener evidencias de la funcionalidad de los mismos. El objetivo del presentetrabajo fue evaluar los efectos inmunomoduladores in vitro del extracto polifenólico (EP) obtenido de tegumento de maní yde péptidos bioactivos antioxidantes (PB) obtenidos de lactosuero, co-productos de las industriasmanisera y láctea respectivamente, que actualmente son subutilizados generandograndes cantidades de desechos que contaminan el ambiente. En primer lugar, se determinó lacitotoxicidad de los ABs en la línea celular HT-29. Se utilizó la técnica MTT, basada enla reducción metabólica del bromuro de3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol permitiendo determinarespectrofotométricamente la funcionalidad mitocondrial de las células tratadas.Las células fueron expuestas a EP en un rango de concentración de 7,81 a 125µg/mL y a los PBs en un rango de 62,5 a 750 µg/mL durante 24 h. Ninguno de losABs mostró citotoxicidad en la línea celular estudiada en las concentracionesevaluadas. Las células HT-29son células de adenocarcinoma colorrectal humano y se encuentran transfectadas conel plásmido pNF-ƙB-hrGPF, el cual contiene el genGPF (green fluorescent protein) bajo control de NFƙb. Se utilizó como estímulo     pro-inflamatorio alfactor de necrosis tumoral (TNF-α, 1ng/mL). Se realizó un pre-tratamiento delas células con los ABs utilizando concentraciones de 15,63 a 62,5 µg/mLdel EP y de 250 a 750 µg/mL de los PBs durante 3 h y luego se agregó TNF-α durante 24 h. Finalmente se midióel porcentaje de células GPF positivas (% GFP+) evaluadas porcitometría de flujo, analizando también la viabilidad celular mediante Iodurode Propidio. Se utilizó el citómetro de flujo Attune NxT. Ambos ABsmostraron un efecto modulador de la activación de NFƙB concentración dependiente, ya que disminuyeronsignificativamente el % deGPF+ con respecto al estimulante TNF-α. La viabilidad celularde todos los tratamientos fue del 90% ±10. Además, se cuantificó la IL-8 en elsobrenadante obtenido del ensayo del efecto inmunomodulador mediante el kitBiolegend ELISA MAXTM Deluxe Set siguiendo las instrucciones delfabricante. Los ABs disminuyeron significativamente la concentración de IL-8 decélulas estimuladas con TNF-α, mostrando un efecto anti-inflamatorio en lasconcentraciones evaluadas. Por lo tanto, podríamos concluir que dichos ABspodrían incluirse como potenciales ingredientes anti-inflamatorios en matricesalimenticias.