CIDCA   05380
CENTRO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN CRIOTECNOLOGIA DE ALIMENTOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Empleo de líneas celulares epiteliales para el análisis de inmunomoduladores mucosales
Autor/es:
SMALDINI PAOLA; FOSSATI ALBERTO; DOCENA GUILLERMO H.
Lugar:
LA FLDA CORDOBA
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y Grupo Rioplatense de citometría de flujo; 2008
Resumen:
<!--
/* Style Definitions */
p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal
{mso-style-parent:"";
margin:0cm;
margin-bottom:.0001pt;
mso-pagination:widow-orphan;
font-size:12.0pt;
font-family:"Times New Roman";
mso-fareast-font-family:"Times New Roman";
mso-ansi-language:ES-TRAD;
mso-fareast-language:ES-TRAD;}
@page Section1
{size:595.3pt 841.9pt;
margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm;
mso-header-margin:35.4pt;
mso-footer-margin:35.4pt;
mso-paper-source:0;}
div.Section1
{page:Section1;}
-->
Las células epiteliales de las distintas mucosas no
sólo cumplen una función físico-química, sino que con ejercen además un rol activador y modulador
del sistema inmune de mucosas. El objetivo de este trabajo es emplear distintas
células epiteliales mucosales para el estudio de inmunomoduladores a emplear en
el tratamiento de diferentes patologías.
Se emplearon líneas epiteliales humanas de pulmón (A549),
de intestino (Caco-2 y Caco-luciferasa), epiteliales murinas de intestino delgado
(iCCL2) y cultivo primario de enterocitos de intestino delgado de ratón. Los
estímulos empleados fueron: agonistas toll (Flagelina, Lipopolisacarido,
Lipohexapéptido Pam3CSK4) (Flic, LPS y Lp) y citoquinas pro-inflamatorias (IL-1β,
TNF-a). Se evaluó la respuesta celular por citometría de
flujo (TLR2) y PCR tiempo real (receptores tipo Toll-TLR2, TLR4, TLR5 y TLR9,
quimokinas-MCP-1, IL-8 y CCL20 y citoquinas-IL-1 β, IL-6 y TNF-a).
Células intestinales humanas incubadas con distintos
estímulos mostró expresión de mRNA para CCL20 (Flic, IL-1β, TNF-a), MCP-1 (Flic,
LPS y TNF-a) e IL-8 (Flic, LPS y TNF+Lp). Solo hay activación con
Lp cuando las células son pre-estimuladas con Flic, IL-1β, TNF-a. La
cinética de activación de Caco-2 varçia según el estimulo. Al analizar la
expresión de mRNA para los TLR solo vimos una inducción estadísticamente
significativa post estimulación para TLR2, TLR5 y TLR9. La cinética de
inducción de los distintos mRNA de TLR es diferente.
Para A549 e iCCL2 observamos inducción de mRNA CCL20
para Flic (FI: 3400±600), LPS (FI:39±4.5), Lp
(FI: 57±12), IL-1 β (FI:7820±3120) y TNF-a (FI: 2094±440). Con respecto a iCCL2 los
incrementos de mRNA CCL20 se observaron para: Flic (FI:477±269), LPS (FI:256
±102), Lp (FI: 62±8.6). En estos casos se obtuvo una
inducción en los mRNA para IL-1, IL-6 y TNF-a. Se obtuvo el mayor incremento para LPS
y Flic, y en TNF-a (FI:57±21 para Flic y 558±210 para
LPS).
Estos resultados sugieren que Caco-2 expresa
constitutivamente TLR-4 y 5, A549 e iCCL2, TLR-2,4 y 5. Caco-2 solo expresa TLR-2
luego de ser activadas.
Por lo tanto hemos caracterizado líneas epiteliales
humanas y murinas, y sus formas de activación, para la caracterización
funcional de ligandos inmunomoduladores a emplear por distintas vías mucosales.