CIDCA   05380
CENTRO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN CRIOTECNOLOGIA DE ALIMENTOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Fagocitosis e Inducción de la Expresión de CD86 por Lactobacillus y Bifidobacterias en condiciones opsónicas y no opsónicas.
Autor/es:
RACEDO, S.M.; ROLNY, I. S.; PÉREZ, P. F
Lugar:
La Falda. Córdoba. Argentina.
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología. XI Jornada Científica del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo.; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología y Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo.
Resumen:
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En nuestro
laboratorio, se estudió la capacidad de microorganismos (Mo) potencialmente
probióticos para adherirse a enterocitos y excluir patógenos pero su
interacción con células fagocíticas es desconocida. Por esto, evaluamos el
efecto de Lactobacillus delbrueckii subsp lactis CIDCA 133 , L. plantarum CIDCA
83114, Bifidobacterium bifidum CIDCA 5310 y B. infantis NCC 200 sobre células
RAW 264.7, determinando fagocitosis y expresión de CD86 en condiciones
opsónicas (op) y no opsónicas (s/op). Se opsonizó con suero de ratón y se
infectó con 50 Mo/célula. Las células se crecieron en RPMI1640 completo. La
fagocitosis se evaluó por: a) Microscopía: los Mo op y s/op fueron coincubados
con las células, 30 min a 37ºC, se coloreó con Gram y se determinó el % de células
con Mo asociados. b) Citometría de Flujo (CF): los Mo se colorearon con éster
de carboxifluoresceina (CFSE) y se coincubaron con las células. Durante la
adquisición, la fluorescencia extracelular fue apantallada con azul Tripán. Se
determinó el % de células CFSE+. La expresión de CD86 fue medida mediante CF
con anti-CD86-PE. Las células fueron más efectivas para fagocitar 133 que los
otros Mo estudiados. Se observó un incremento del % de células con Mo asociados
en los grupos 133, 5310 y NCC 200 op comparado con s/op pero para 83114, no
hubo diferencias. Las cepas 133, 5310 y 83114 indujeron incremento de la
expresión de CD86 comparado con el control, sin embargo la cepa 133 fue más
eficiente para inducir la expresión de este marcador.
% de células con Mo asociados
% de células CFSE+
% de células CFSE+
% de células CD86
No apantalladas
apantalladas
Control
0
0
0
13.1±0.3
133
63.4±4.6
39.9±4.1
27.9±7.7
42.0±10.0ψ
133op
80.4±8.5*
50.7±10.9*
42.4±9.1*
62.2±2.6 ψ
83114
55.9±4.5
31.8±4.3
28.2±6.7
22.9±1.2ψ
83114op
58.2±4.1
25.2±2.8
27.3±1.6
18.3±4.9 ψ
5310
52.3±3.8
24.6±8.4
17.5±6.6
18.9±2.1ψ
5310op
64.4±3.1*
40.7±1.12*
39.4±1.7*
21.4±3.2ψ
NC 200
40,1±5,6
36.8±7.9
29.9±4.2
12.9±7.5
NC 200
56.6±9,5*
49.5±2.8*
43.9±1.8*
10.2±0.0
a ψ p menor
0.05 contrasta con control s/infectar en expresión de CD86, * p menor 0.05
contrasta op con s/op de un mismo Mo.
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En conclusión, la fagocitosis de 133, 5310 y NCC
200 se ve favorecida por la opsonización, sin embargo esto no estaría
directamente relacionado con la capacidad de estos Mo para inducir de la
expresión de CD86.
Nuestros resultados demuestran diferentes capacidades de estos microorganismos
para interaccionar con células fagocíticas profesionales lo cual podría
implicar diferentes efectos in vivo