Inhibición de la expresión de CCL20 en células de epitelio intestinal por levaduras aisladas de kefir: estudios in vitro e in vivo.

ROMANIN D E; SERRADELL M A; GONZÁLEZ MACIEL D; STRINGA P; LAUSADA N; GARROTE G L; RUMBO M

Córdoba, Argentina

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunológica y XI Jornada Científica Del Grupo Rioplatense De Citometría De Flujo; 2008

Se han descripto diversos mecanismos de modulación de la respuesta innata en mucosas mediada por numerosas especies bacterianas diferentes, sin embargo, el conocimiento sobre la capacidad inmunomodulatoria de las levaduras es más limitado. En trabajos previos hemos demostrado que distintas especies de levaduras aisladas de kefir inhiben el efecto de la estimulación de células Caco-2 con flagelina (FliC), tanto en un sistema reportero (Caco-2 ccl20:luciferasa), como sobre la expresión del mRNA de CCL20, CXCL-8 y CXCL-2. En el presente trabajo se seleccionó la cepa Kluyveromyces marxianus CIDCA 8154 (Km 8154) y se estudió su capacidad de inhibir la expresión de CCL20 inducida por FliC en células epiteliales en cultivo (líneas intestinales humanas Caco-2 y HT-29, y cultivo primario de enterocitos murinos), y en un modelo de asa ligada en ratón. La pre-incubación de células Caco-2 con una suspensión de Km 8154 (108 ufc/ml) redujo 30 veces la expresión del mRNA de CCL20 inducida por FliC (P<0.05). Resultados similares fueron obtenidos sobre células HT-29, tanto estimulando con FliC como con LPS. Por otro lado, el aumento en la expresión del mRNA de CCL20 en un cultivo primario de enterocitos murinos estimulados con FliC se redujo a niveles basales (P<0.05) debido a la pre-incubación con Km 8154. En base a estos resultados, se realizó un ensayo in vivo empleando un modelo de asa intestinal ligada en ratones BALB/c. Los animales fueron anestesiados y permanecieron en dicho estado durante todo el experimento. Luego de la ligación, se inyectó intraluminalmente una suspensión de Km 8154 (2.3 ±0.5 107 levaduras) o PBS en la región proximal, y luego de 30 minutos, se inoculó una solución de FliC (450 mg/ratón) o PBS. Los animales fueron sacrificados 90 minutos luego de la última inoculación. En estas condiciones, los ratones tratados con FliC triplicaron la expresión del mRNA de CCL20 y la administración previa de Km 8154 en el lumen intestinal redujo los efectos de dicha estimulación a niveles basales (P<0.05). Los resultados obtenidos muestran que el efecto observado no se restringe a una línea celular particular, sino que la interacción levadura-epitelio es capaz de modular la activación de la respuesta innata epitelial tanto en modelos ex vivo como in vivo. Esta propiedad podría ser de utilidad en el tratamiento de patologías asociadas a fenómenos inflamatorios del tracto gastrointestinal.