Análisis de las vías de señalización implicadas en la modulación de la respuesta inmune innata epitelial por microorganismos probióticos.

ROMANIN, D; SMALDINI, P; HIRIART, Y; GARROTE, G; RUMBO, M

San Miguel de Tucumán

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Sociedad Argentina de Inmunología

Diversos microorganismos probióticos pueden modular la respuesta inmune, sin embargo, los mecanismos involucrados aún no han sido totalmente esclarecidos. En trabajos previos hemos demostrado que microorganismos aislados de kefir, un fermento lácteo artesanal, poseen capacidad modulatoria de la respuesta innata epitelial disparada por flagelina. El objetivo del presente trabajo es estudiar las vías de señalización implicadas en la respuesta epitelial frente a flagelina y su modulación por microorganismos probióticos, incluyendo un panel de levaduras y bacterias ácido lácticas aisladas de kefir. Mediante un sistema reportero Caco-2 ccl20:luc, que expresa el gen de luciferasa bajo el promotor de la quimoquina Ccl20 y el uso de inhibidores específicos, se evidenció que la respuesta a flagelina se monta principalmente a través de las vías de la familia NF-κB y de las MAP-Kinasas. Empleando este sistema se determinó que las cepas de levadura muestran un muy alto poder de modulación de la respuesta innata (mayor del 90% de inhibición del sistema Caco-2 ccl20-luc activado por flatelina) mientras que la capacidad modulatoria de las bacterias ácido lácticas resulto menor (< 50% de inhibición). Mediante análisis por Western-blot e inmunofluorescencia se evidenció que las levaduras Kluyveromyces marxianus CIDCA 8154 y Saccharomyces cerevisiae CIDCA 8112 son capaces de modular la respuesta disparada por flagelina mediante la inhibición de la traslocación del factor de transcripción NF-κB. Empleando sondas inmunofluorescentes sensibles a especies reactivas de oxígeno (ROS) se encontró que entre otras Lactobacillus plantarum DSMZ 20174 y Lactobacillus delbrueckii subsp lactis CIDCA 133 inducen significativamente la producción de ROS (~1000%) mecanismo,responsable de la inhibición de la vía de NF-kB por modulación de los sistemas de degradación de proteínas citosólicas. La capacidad de inducción de ROS de estas bacterias, estaría implicada en la moderada modulación de la respuesta innata. Sin embargo, en el caso de las levaduras, la capacidad de inducción de ROS es moderada o nula. Los resultados indican que existirían distintos mecanismos de modulación para cada microorganismo y que la eficacia de los mismos es diferente. El estudio de la influencia de los microorganismos probióticos sobre la señalización intracelular de células epiteliales sería de utilidad para el desarrollo de alternativas terapéuticas complementarias para enfermedades inflamatorias intestinales.