CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

Aislamiento de fagos específicos contra Klebsiella pneumoniae panresistente: unenfoque prometedor para combatir la resistencia a los antibióticos.La resistencia a los antibióticos es un desafío creciente en la salud pública a nivel mundial. Enparticular, las infecciones causadas por la bacteria Klebsiella pneumoniae se han vuelto cada vezmás difíciles de tratar debido a su capacidad de desarrollar resistencia a múltiples antibióticos.En septiembre de 2022, se aisló en Argentina una cepa de Klebsiella pneumoniae productora decarbapenemasas. Al realizar la determinación de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) y/ola prueba de difusión por discos, se confirmó la resistencia fenotípica a penicilinas,cefalosporinas, monobactames, carbapenemes, aminoglucósidos, fosfomicina, lipopéptidos,tetraciclinas/glicilciclinas, quinolonas, rifamicinas, inhibidores de folato, fenicoles y nitrofuranosdisponibles en Argentina. Debido a su alta resistencia, se consideró el uso de bacteriófagos comouna alternativa para su tratamiento.El objetivo de este estudio fue aislar, caracterizar y secuenciar bacteriófagos capaces de lisarcepas de Klebsiella pneumoniae resistentes a antibióticos, y seleccionar aquellos que no poseangenes de resistencia a antibióticos ni genes asociados a la lisogenia para su uso en fagoterapia.Se recolectaron muestras de agua residual de frigoríficos y aguas cloacales cercanas a un hospitalpara aislar los bacteriófagos de Klebsiella pneumoniae. Los fagos se propagaron en caldo LB-CaMg. Se extrajo el ADN con fenol-cloroformo y se analizó su patrón de restricción utilizandosoftware BioNumerics V6. La secuenciación del ADN se realizó con el kit ADN Nextera XT(Illumina). Las secuencias se ensamblaron y se evaluó su calidad con el software FastQ. Seconfirmó el ensamblaje del genoma mediante PCR y se predijeron los genes utilizandoGeneMark y ORF Finder. Se compararon las secuencias con otros genomas de fagos medianteNCBI blastn.Se logró aislar un total de 8 fagos altamente específicos para la cepa panresistente de Klebsiellapneumoniae. Todos demostraron tener capacidad de lisar la cepa en medio líquido en un tiempode 2 horas, obteniendo un título de 10*10 UFP/mL. Cuando se realizaron los cortes con enzimas,se observaron 5 patrones diferentes. El análisis de secuenciación reveló que los fagosseleccionados no poseían genes de resistencia a antibióticos ni genes asociados a la lisogenia.Los resultados obtenidos indican que los bacteriófagos específicos aislados en este estudiopodrían ser una alternativa prometedora como adyuvantes a la terapia antibiótica en eltratamiento de infecciones causadas por la cepa de Klebsiella pneumoniae resistente aantibióticos. La capacidad de los fagos para destruir selectivamente las bacterias objetivo, sinafectar a las células humanas sanas, y su capacidad de adaptación a las bacterias en constanteevolución los convierten en una opción potencialmente efectiva contra las cepas resistentes.

enviar mensaje