“Caracterización inmunoquímica de proteínas de capa-s de Lactobacillus kefir. Diferencias con L parakefir y L brevis

SERRADELL M A; MOBILI P,; GARROTE G L; ABRAHAM A. G.; FOSSATI C A; DE ANTONI G L

Quilmes . Argentina

Congreso; III Congreso de la Sociedad Argentina de Microbiología General, SAMIGE,; 2006

SAM

La capa-S es una estructura superficial cristalina bidimensional formada por subunidades constituidas por una o dos proteínas o glicoproteínas, unidas entre sí de manera no covalente. Se ha sugerido la participación de la capa-S en la adherencia de diferentes especies de lactobacilos a células de epitelio intestinal y a componentes de matriz extracelular. Estudios previos realizados por nuestro laboratorio demostraron mediante SDS-PAGE y microscopía electrónica de trasmisión, la presencia de capa-S en lactobacilos heterofermentativos aislados de kefir. Dichas cepas presentan diferentes propiedades de superficie por lo que nos planteamos como objetivo caracterizar las proteínas de capa-S diferentes lactobacilos empleando anticuerpos específicos. Con tal fin, se obtuvieron dos antisueros en conejo empleando como inmunógenos las proteínas de capa-S de L kefir CIDCA 8321 aislada de gránulos de kefir (Ac21) y L brevis ATCC 8287 (Ac87) respectivamente. El Ac21 mostró reactividad por ELISA e inmunoblotting frente a proteínas de capa-S de distintos aislados de L kefir y L parakefir, pero no frente a L brevis. De la misma manera el Ac87 mostró reactividad por dot-blot frente a proteínas de capa-S de L brevis, mientras que no lo hizo frente a las de L kefir. Por otra parte, se obtuvieron 3 anticuerpos monoclonales (1F8, 4H6 y 5F8) específicos de capa-S de L kefir CIDCA 8348. Se observó que dichos anticuerpos monoclonales presentan perfiles de reactividad diferentes tanto por ELISA como por inmunoblotting frente a proteínas de capa-S de distintos aislados de L kefir y no reaccionan con proteínas de capa-S de L brevis. Resultados similares se obtuvieron al realizar ensayos de dot-blot con bacteria entera. Por lo tanto, los resultados obtenidos indican la presencia de epitopes de reactividad cruzada entre proteínas de capa-S de L kefir y L parakefir, pero no con capa-S de L brevis. Asimismo, los distintos perfiles de reactividad de los anticuerpos monoclonales frente a los aislados de L kefir sugieren la existencia de diferencias estructurales entre las proteínas de capa-S dentro de la misma especie, las cuales parecerían correlacionar con diferencias en las propiedades de superficie de los aislados estudiados.