INVESTIGADORES
TYMCZYSZYN Emma Elizabeth
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de las defensinas humanas 1 y 2 sobre la membrana de bacterias lácticas intactas y sobre liposomas formados por sus lípidos
Autor/es:
HUGO A.; TYMCZYSZYN E,; GOMEZ ZAVAGLIA, A.; PÉREZ, P. F.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XI Congreso Latinoamericano de Microbiología e Higiene de Alimentos; 2012
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
Las defensinas son péptidos antimicrobianos (AMPs)
con actividad contra un amplio rango de patógenos. Las β-defensinas
humanas son producidas por células de distintas mucosas formando la primera
línea de defensa. Al igual que otros AMPs son pequeñas moléculas catiónicas que
interaccionan con los grupos negativos de la membrana celular provocando su desorganización.
Las bacterias lácticas pueden presentar diferente sensibilidad a
las β-defensinas lo cual afectaría su capacidad para resistir el pasaje por el
tracto digestivo y ejercer su efecto probiótico. Lactobacillus delbruekii subsp.
lactis CIDCA 133 y Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
CIDCA 331 tienen diferente susceptibilidad a las β-defensinas humanas 1 (HBD-1) y 2 (HBD-2),
así como también a factores secretados por enterocitos. Mientras que la cepa CIDCA
133 es capaz de resistir el efecto inhibitorio de ambas defensinas, la cepa CIDCA
331 es fuertemente inhibida por ambas, en particular por HBD-2.
El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de HBD-1 y
HBD-2 sobre la membrana de bacterias intactas y sobre liposomas formados con
lípidos extraídos de las mismas.
El efecto sobre la permeabilidad en células intactas se estudió
por citometría de flujo utilizando la sonda ioduro de propidio (IP). El efecto
sobre los liposomas se evaluó a través de la cinética de liberación de carboxy
fluoresceína (CF) encapsulada medida por espectroscopia de fluorescencia. Se
utilizó nisina como control positivo.
La
exposición a HBD-2 produjo la permeabilización de la membrana de Lactobacillus
bulgaricus tanto en bacterias intactas como en liposomas. La incorporación
de IP por parte de la cepa CIDCA 331fue de 2.5 a 3.5 veces superior a la
de la cepa CIDCA 133 para 4 y 8 µg/ml de HBD-2. En el mismo sentido
concentraciones de 1 y 2 µg/ml de HBD-2 provocaron una liberación del 26 al 35%
de CF desde los liposomas de la cepa CIDCA 331 sin afectar a los liposomas de
la cepa 133.
La alta
sensibilidad de la cepa CIDCA 331 a la HBD-2 podría relacionarse con una fuerte
interacción con sus lípidos de membrana que presenta una mayor relación
fosfolípidos/glicolípidos (aumentando su carga negativa) respecto a la cepa
CIDCA 133. Estos resultados indican la importancia de la composición lipídica
de la membrana, frente a la acción de péptidos antimicrobianos como las
defensinas. Además representan un avance para comprender la interacción entre
el huésped y los microorganismos
probióticos.