Efecto de inhibidores de vías de señalización por lípidos fosforilados sobre la virulencia de Bacillus cereus.

MINNAARD, J.; ROLNY, I. S. Y PÉREZ, P. F.

Mendoza

Jornada; XII Jornadas Argentinas de Microbiología. I Jornadas Conjuntas de Microbiología, Infectología y Alergia e Inmunología de Cuyo. III Jornadas Mendocinas de Zoonosis.; 2006

Bacillus cereus es capaz de interaccionar con enterocitos afectando el citoesqueleto, la viabilidad y la morfología celular. Las vías de señalización por lípidos fosforilados son importantes en la virulencia de numerosos microorganismos. En este trabajo se estudia el efecto de inhibidores de vías de señalización por lípidos fosforilados sobre la interacción entre Bacillus cereus y enterocitos. Bacillus cereus T1 se creció en BHI. Se ensayó la adhesión/invasión con enterocitos humanos (línea Caco-2): luego de la incubación (2h/37°C) y lavado de las células, se efectuaron recuentos en placa sin (adhesión) y con (invasión) incubación durante 1 h con gentamicina. El citoesqueleto se marcó con FITC-faloidina y el desprendimiento celular se evaluó mediante coloración con cristal violeta. Se utilizaron Wortmanina y U73122 (separados o en combinación) como inhibidores de fosfatidilinositol 3 fosfato kinasa (PI3K) y fosfatidilinositol fosfolipasa C (PLC) respectivamente. El U73122 y la combinación de ambos inhibidores disminuyeron la adhesión/invasión. Este efecto no se observó con la wortmanina sola. Con respecto al desprendimiento celular, el efecto más marcado se observa con aproximadamente 1.5 x 108 ufc/ml. A esa concentración no se observó protección con wortmanina pero el U73122 o la combinación de ambos inhibidores dejan un remanente de células adheridas de 35%. A menores concentraciones bacterianas, la wortmanina y el U73122 protegen las células del efecto sobre la red de actina. Los resultados muestran la relevancia de las vías que involucran lípidos fosforilados en eventos clave para la virulencia de Bacillus cereus.