ESTUDIO MOLECULAR DE RETINOBLASTOMA

OTTAVIANI DANIELA; FERRER MARCELA; GILIBERTO FLORENCIA; ALFARO GUADALUPE; LUCE LEONELA; CHANTADA GUILLERMO; SZIJAN, IRENE

Buenos Aires

Congreso; 14º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2012

Hospital de Clínicas UBA

ESTUDIO MOLECULAR DE RETINOBLASTOMA OTTAVIANI, Daniela1; FERRER, Marcela2; GILIBERTO, Florencia1; ALFARO, Guadalupe2; LUCE, Leonela1; CHANTADA, Guillermo3; SZIJAN, Irene1.1; FERRER, Marcela2; GILIBERTO, Florencia1; ALFARO, Guadalupe2; LUCE, Leonela1; CHANTADA, Guillermo3; SZIJAN, Irene1.2; LUCE, Leonela1; CHANTADA, Guillermo3; SZIJAN, Irene1. 1 Laboratorio de Neurobiología Molecular - Cátedra de Genética y Biología Molecular - Facultad de Farmacia y Bioquímica, Hospital de Clínicas ?José de San Martín? - UBA. 2 Instituto de Neurociencias, Hospital de Clínicas ?José de San Martín?. 3 Hospital de Pediatría ?Prof. Garrahan?. Buenos Aires, Argentina. El retinoblastoma (RB), cáncer ocular de la niñez, puede ser hereditario (40%) con alta penetrancia (90%) o no hereditario (60%). Se origina por mutaciones en el gen supresor tumoral RB1 (13q14) que incluye mutaciones puntuales, deleciones o inserciones de pocas pb (80%) y grandes rearreglos: deleciones o duplicaciones (20%). El tumor puede presentarse en uno (RB unilateral) o ambos ojos (RB bilateral). Existe un tercer caso, el llamado RB trilateral: RB bilateral asociado a un tumor intracraneal en la región pineal o supraselar. El retinoblastoma hereditario aumenta el riesgo del niño de padecer otros tipos de cáncer como osteosarcoma, sarcoma de tejido blando o melanoma en años posteriores. El análisis molecular es importante para identificar la mutación en el paciente de modo que permita revelar el carácter hereditario en los casos unilaterales, y la detección precoz de familiares susceptibles de padecer RB para llevar a cabo un tratamiento temprano, y realizar el diagnóstico genético preimplantatorio (DGP) en aquellos pacientes que deseen tener descendencia.Instituto de Neurociencias, Hospital de Clínicas ?José de San Martín?. 3 Hospital de Pediatría ?Prof. Garrahan?. Buenos Aires, Argentina. El retinoblastoma (RB), cáncer ocular de la niñez, puede ser hereditario (40%) con alta penetrancia (90%) o no hereditario (60%). Se origina por mutaciones en el gen supresor tumoral RB1 (13q14) que incluye mutaciones puntuales, deleciones o inserciones de pocas pb (80%) y grandes rearreglos: deleciones o duplicaciones (20%). El tumor puede presentarse en uno (RB unilateral) o ambos ojos (RB bilateral). Existe un tercer caso, el llamado RB trilateral: RB bilateral asociado a un tumor intracraneal en la región pineal o supraselar. El retinoblastoma hereditario aumenta el riesgo del niño de padecer otros tipos de cáncer como osteosarcoma, sarcoma de tejido blando o melanoma en años posteriores. El análisis molecular es importante para identificar la mutación en el paciente de modo que permita revelar el carácter hereditario en los casos unilaterales, y la detección precoz de familiares susceptibles de padecer RB para llevar a cabo un tratamiento temprano, y realizar el diagnóstico genético preimplantatorio (DGP) en aquellos pacientes que deseen tener descendencia.RB1 (13q14) que incluye mutaciones puntuales, deleciones o inserciones de pocas pb (80%) y grandes rearreglos: deleciones o duplicaciones (20%). El tumor puede presentarse en uno (RB unilateral) o ambos ojos (RB bilateral). Existe un tercer caso, el llamado RB trilateral: RB bilateral asociado a un tumor intracraneal en la región pineal o supraselar. El retinoblastoma hereditario aumenta el riesgo del niño de padecer otros tipos de cáncer como osteosarcoma, sarcoma de tejido blando o melanoma en años posteriores. El análisis molecular es importante para identificar la mutación en el paciente de modo que permita revelar el carácter hereditario en los casos unilaterales, y la detección precoz de familiares susceptibles de padecer RB para llevar a cabo un tratamiento temprano, y realizar el diagnóstico genético preimplantatorio (DGP) en aquellos pacientes que deseen tener descendencia. Objetivo. Estudio molecular de pacientes con retinoblastoma para la identificación de la mutación y analizar la alteración genética encontrada en contexto de la presentación clínica de cada caso en particular.Estudio molecular de pacientes con retinoblastoma para la identificación de la mutación y analizar la alteración genética encontrada en contexto de la presentación clínica de cada caso en particular. Materiales y Métodos. Se estudiaron 5 pacientes: a) 1 caso unilateral que requiere identificar la mutación para llevar a cabo un DGP, b) 1 caso familiar con dos afectados bilaterales, con tumor secundario (osteosarcoma) en uno de ellos, c) 1 caso unilateral enucleado recientemente y d) 1 caso bilateral de diagnóstico clínico complejo. Se analizó: i) la segregación de 5 polimorfismos intragénicos en todos las familias, a partir de ADN de sangre periférica y tumoral para determinar el haplotipo de riesgo y analizar la pérdida de heterocigosidad (LOH) en el tumor; ii) la secuenciación de la región promotora y los 27 exones del gen RB1.Se estudiaron 5 pacientes: a) 1 caso unilateral que requiere identificar la mutación para llevar a cabo un DGP, b) 1 caso familiar con dos afectados bilaterales, con tumor secundario (osteosarcoma) en uno de ellos, c) 1 caso unilateral enucleado recientemente y d) 1 caso bilateral de diagnóstico clínico complejo. Se analizó: i) la segregación de 5 polimorfismos intragénicos en todos las familias, a partir de ADN de sangre periférica y tumoral para determinar el haplotipo de riesgo y analizar la pérdida de heterocigosidad (LOH) en el tumor; ii) la secuenciación de la región promotora y los 27 exones del gen RB1.RB1. Resultados. El análisis molecular permitió: a) identificar la mutación de origen germinal en el paciente unilateral, b) determinar el haplotipo de riesgo e identificar a los portadores de la mutación c) determinar LOH e identificar la mutación en el ADN tumoral, y d) identificar la mutación en el paciente con diagnóstico clínico complejo.El análisis molecular permitió: a) identificar la mutación de origen germinal en el paciente unilateral, b) determinar el haplotipo de riesgo e identificar a los portadores de la mutación c) determinar LOH e identificar la mutación en el ADN tumoral, y d) identificar la mutación en el paciente con diagnóstico clínico complejo. Conclusiones. El estudio genético de Retinoblastoma permite identificar la mutación en el gen RB1 de la mayoría de los pacientes analizados. El presente trabajo permitió confirmar el origen germinal y somático de la mutación en los pacientes unilaterales analizados, y la identificación de la mutación germinal en uno de ellos permitió, además, la realización del DGP. La caracterización del haplotipo de riesgo y de la mutación germinal en el caso familiar permitió detectar a portadores de la mutación que no desarrollaron RB durante la niñez y asesorarlos genéticamente sobre la posibilidad de trasmitir dicha mutación a su descendencia y de desarrollar otros tipos de tumores. Así mismo, la identificación de la mutación en los casos clínicos complejos contribuye con la información actual disponible sobre las bases moleculares de la correlación genotipo/fenotipo, así como a la base de datos mundial de mutaciones RB1.El estudio genético de Retinoblastoma permite identificar la mutación en el gen RB1 de la mayoría de los pacientes analizados. El presente trabajo permitió confirmar el origen germinal y somático de la mutación en los pacientes unilaterales analizados, y la identificación de la mutación germinal en uno de ellos permitió, además, la realización del DGP. La caracterización del haplotipo de riesgo y de la mutación germinal en el caso familiar permitió detectar a portadores de la mutación que no desarrollaron RB durante la niñez y asesorarlos genéticamente sobre la posibilidad de trasmitir dicha mutación a su descendencia y de desarrollar otros tipos de tumores. Así mismo, la identificación de la mutación en los casos clínicos complejos contribuye con la información actual disponible sobre las bases moleculares de la correlación genotipo/fenotipo, así como a la base de datos mundial de mutaciones RB1.RB1 de la mayoría de los pacientes analizados. El presente trabajo permitió confirmar el origen germinal y somático de la mutación en los pacientes unilaterales analizados, y la identificación de la mutación germinal en uno de ellos permitió, además, la realización del DGP. La caracterización del haplotipo de riesgo y de la mutación germinal en el caso familiar permitió detectar a portadores de la mutación que no desarrollaron RB durante la niñez y asesorarlos genéticamente sobre la posibilidad de trasmitir dicha mutación a su descendencia y de desarrollar otros tipos de tumores. Así mismo, la identificación de la mutación en los casos clínicos complejos contribuye con la información actual disponible sobre las bases moleculares de la correlación genotipo/fenotipo, así como a la base de datos mundial de mutaciones RB1.RB1.