Rastreo de mutaciones del gen RB1 en pacientes con Retinoblastoma

PIAZZA G; PAIVA-PALOMINO J; GILIBERTO F; FANDIÑO A; CHANTADA G; DÁVILA M; SZIJAN I.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

Rastreo de mutaciones del gen RB1 en pacientes con retinoblastoma GP Guillermo1, J Paiva-Palomino, F Giliberto1, A Fandiño 2, G Chantada 2, MT Dávila 2 e I Szijan1. 1 Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica y Hospital de Clínicas “José de San Martín” UBA 2 Hospital de Pediatría Profesor Garrahan, Servicios de Oftalmología, Oncología y Anatomía Patológica 1 Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica y Hospital de Clínicas “José de San Martín” UBA 2 Hospital de Pediatría Profesor Garrahan, Servicios de Oftalmología, Oncología y Anatomía Patológica 1 Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica y Hospital de Clínicas “José de San Martín” UBA 2 Hospital de Pediatría Profesor Garrahan, Servicios de Oftalmología, Oncología y Anatomía Patológica 1 Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica y Hospital de Clínicas “José de San Martín” UBA 2 Hospital de Pediatría Profesor Garrahan, Servicios de Oftalmología, Oncología y Anatomía Patológica 1 Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica y Hospital de Clínicas “José de San Martín” UBA 2 Hospital de Pediatría Profesor Garrahan, Servicios de Oftalmología, Oncología y Anatomía Patológica El retinoblastoma (RB), tumor maligno de niñez, causado por pérdida de función del gen supresor tumoral RB1 (13q14) tiene dos formas: hereditaria (40%) y no hereditaria (60%). Las mutaciones descriptas incluyen grandes rearreglos (20%) y mutaciones pequeñas (80%) su estudio es importante para determinar el riesgo en familiares de pacientes. El objetivo es estudiar 15 familias con RB, 3 con historia familiar, para identificar las mutaciones y predecir el riesgo. Se analizaron 9 pacientes con RB bilateral (hereditario) y 7 unilaterales (75% no hereditario) por medio de: i) Segregación de polimorfismos, para determinar haplotipo de riesgo y detectar grandes deleciones y ii) Identificación de mutaciones pequeñas. Se estudiaron 4 polimorfismos intragénicos: 3 RFLPs y un VNTR: CTTT(T) y se amplificaron por PCR región promotora, 27 exones y región poliadenilada de RB1 para analizar los productos por heteroduplex/secuenciación. La segregación de polimorfismos en dos familias con varios afectados permitió determinar haplotipos de riesgo y excluir a hermanos de pacientes. En la tercer familia dos primas segundas con RB mostraron diferentes haplotipos sugiriendo diferentes mutaciones causantes de RB, además se detectó una recombinación en el gen RB1, entre intrones 4 y 17, durante transmisión de madre a hija. En un caso esporádico el hermano del paciente heredó diferentes haplitipos paterno materno y pudo ser excluido del riesgo. El ensayo de heteroduplex detectó alteraciones en patrones de migración de exones 21 y 18 en dos familias, la secuenciación del exón 21 identificó la mutación g160833delA que produce desfasaje y codón stop, pE737fsX743. La identificación de haplotipos de riesgo y de mutaciones es útil para un diagnóstico temprano y para excluir a niños, familiares de pacientes, del riesgo de susceptibilidad a RB. El estudio de una familia con pacientes emparentados no cercanos brindó información sobre eventos de mutagénesis y recombinación en el gen RB1. El retinoblastoma (RB), tumor maligno de niñez, causado por pérdida de función del gen supresor tumoral RB1 (13q14) tiene dos formas: hereditaria (40%) y no hereditaria (60%). Las mutaciones descriptas incluyen grandes rearreglos (20%) y mutaciones pequeñas (80%) su estudio es importante para determinar el riesgo en familiares de pacientes. El objetivo es estudiar 15 familias con RB, 3 con historia familiar, para identificar las mutaciones y predecir el riesgo. Se analizaron 9 pacientes con RB bilateral (hereditario) y 7 unilaterales (75% no hereditario) por medio de: i) Segregación de polimorfismos, para determinar haplotipo de riesgo y detectar grandes deleciones y ii) Identificación de mutaciones pequeñas. Se estudiaron 4 polimorfismos intragénicos: 3 RFLPs y un VNTR: CTTT(T) y se amplificaron por PCR región promotora, 27 exones y región poliadenilada de RB1 para analizar los productos por heteroduplex/secuenciación. La segregación de polimorfismos en dos familias con varios afectados permitió determinar haplotipos de riesgo y excluir a hermanos de pacientes. En la tercer familia dos primas segundas con RB mostraron diferentes haplotipos sugiriendo diferentes mutaciones causantes de RB, además se detectó una recombinación en el gen RB1, entre intrones 4 y 17, durante transmisión de madre a hija. En un caso esporádico el hermano del paciente heredó diferentes haplitipos paterno materno y pudo ser excluido del riesgo. El ensayo de heteroduplex detectó alteraciones en patrones de migración de exones 21 y 18 en dos familias, la secuenciación del exón 21 identificó la mutación g160833delA que produce desfasaje y codón stop, pE737fsX743. La identificación de haplotipos de riesgo y de mutaciones es útil para un diagnóstico temprano y para excluir a niños, familiares de pacientes, del riesgo de susceptibilidad a RB. El estudio de una familia con pacientes emparentados no cercanos brindó información sobre eventos de mutagénesis y recombinación en el gen RB1. El retinoblastoma (RB), tumor maligno de niñez, causado por pérdida de función del gen supresor tumoral RB1 (13q14) tiene dos formas: hereditaria (40%) y no hereditaria (60%). Las mutaciones descriptas incluyen grandes rearreglos (20%) y mutaciones pequeñas (80%) su estudio es importante para determinar el riesgo en familiares de pacientes. El objetivo es estudiar 15 familias con RB, 3 con historia familiar, para identificar las mutaciones y predecir el riesgo. Se analizaron 9 pacientes con RB bilateral (hereditario) y 7 unilaterales (75% no hereditario) por medio de: i) Segregación de polimorfismos, para determinar haplotipo de riesgo y detectar grandes deleciones y ii) Identificación de mutaciones pequeñas. Se estudiaron 4 polimorfismos intragénicos: 3 RFLPs y un VNTR: CTTT(T) y se amplificaron por PCR región promotora, 27 exones y región poliadenilada de RB1 para analizar los productos por heteroduplex/secuenciación. La segregación de polimorfismos en dos familias con varios afectados permitió determinar haplotipos de riesgo y excluir a hermanos de pacientes. En la tercer familia dos primas segundas con RB mostraron diferentes haplotipos sugiriendo diferentes mutaciones causantes de RB, además se detectó una recombinación en el gen RB1, entre intrones 4 y 17, durante transmisión de madre a hija. En un caso esporádico el hermano del paciente heredó diferentes haplitipos paterno materno y pudo ser excluido del riesgo. El ensayo de heteroduplex detectó alteraciones en patrones de migración de exones 21 y 18 en dos familias, la secuenciación del exón 21 identificó la mutación g160833delA que produce desfasaje y codón stop, pE737fsX743. La identificación de haplotipos de riesgo y de mutaciones es útil para un diagnóstico temprano y para excluir a niños, familiares de pacientes, del riesgo de susceptibilidad a RB. El estudio de una familia con pacientes emparentados no cercanos brindó información sobre eventos de mutagénesis y recombinación en el gen RB1. El retinoblastoma (RB), tumor maligno de niñez, causado por pérdida de función del gen supresor tumoral RB1 (13q14) tiene dos formas: hereditaria (40%) y no hereditaria (60%). Las mutaciones descriptas incluyen grandes rearreglos (20%) y mutaciones pequeñas (80%) su estudio es importante para determinar el riesgo en familiares de pacientes. El objetivo es estudiar 15 familias con RB, 3 con historia familiar, para identificar las mutaciones y predecir el riesgo. Se analizaron 9 pacientes con RB bilateral (hereditario) y 7 unilaterales (75% no hereditario) por medio de: i) Segregación de polimorfismos, para determinar haplotipo de riesgo y detectar grandes deleciones y ii) Identificación de mutaciones pequeñas. Se estudiaron 4 polimorfismos intragénicos: 3 RFLPs y un VNTR: CTTT(T) y se amplificaron por PCR región promotora, 27 exones y región poliadenilada de RB1 para analizar los productos por heteroduplex/secuenciación. La segregación de polimorfismos en dos familias con varios afectados permitió determinar haplotipos de riesgo y excluir a hermanos de pacientes. En la tercer familia dos primas segundas con RB mostraron diferentes haplotipos sugiriendo diferentes mutaciones causantes de RB, además se detectó una recombinación en el gen RB1, entre intrones 4 y 17, durante transmisión de madre a hija. En un caso esporádico el hermano del paciente heredó diferentes haplitipos paterno materno y pudo ser excluido del riesgo. El ensayo de heteroduplex detectó alteraciones en patrones de migración de exones 21 y 18 en dos familias, la secuenciación del exón 21 identificó la mutación g160833delA que produce desfasaje y codón stop, pE737fsX743. La identificación de haplotipos de riesgo y de mutaciones es útil para un diagnóstico temprano y para excluir a niños, familiares de pacientes, del riesgo de susceptibilidad a RB. El estudio de una familia con pacientes emparentados no cercanos brindó información sobre eventos de mutagénesis y recombinación en el gen RB1. El retinoblastoma (RB), tumor maligno de niñez, causado por pérdida de función del gen supresor tumoral RB1 (13q14) tiene dos formas: hereditaria (40%) y no hereditaria (60%). Las mutaciones descriptas incluyen grandes rearreglos (20%) y mutaciones pequeñas (80%) su estudio es importante para determinar el riesgo en familiares de pacientes. El objetivo es estudiar 15 familias con RB, 3 con historia familiar, para identificar las mutaciones y predecir el riesgo. Se analizaron 9 pacientes con RB bilateral (hereditario) y 7 unilaterales (75% no hereditario) por medio de: i) Segregación de polimorfismos, para determinar haplotipo de riesgo y detectar grandes deleciones y ii) Identificación de mutaciones pequeñas. Se estudiaron 4 polimorfismos intragénicos: 3 RFLPs y un VNTR: CTTT(T) y se amplificaron por PCR región promotora, 27 exones y región poliadenilada de RB1 para analizar los productos por heteroduplex/secuenciación. La segregación de polimorfismos en dos familias con varios afectados permitió determinar haplotipos de riesgo y excluir a hermanos de pacientes. En la tercer familia dos primas segundas con RB mostraron diferentes haplotipos sugiriendo diferentes mutaciones causantes de RB, además se detectó una recombinación en el gen RB1, entre intrones 4 y 17, durante transmisión de madre a hija. En un caso esporádico el hermano del paciente heredó diferentes haplitipos paterno materno y pudo ser excluido del riesgo. El ensayo de heteroduplex detectó alteraciones en patrones de migración de exones 21 y 18 en dos familias, la secuenciación del exón 21 identificó la mutación g160833delA que produce desfasaje y codón stop, pE737fsX743. La identificación de haplotipos de riesgo y de mutaciones es útil para un diagnóstico temprano y para excluir a niños, familiares de pacientes, del riesgo de susceptibilidad a RB. El estudio de una familia con pacientes emparentados no cercanos brindó información sobre eventos de mutagénesis y recombinación en el gen RB1.