Distrofia Muscular de Duchenne/Becker: Diagnóstico Molecular directo

VERÓNICA FERREIRO,; FLORENCIA GILIBERTO, ; LILIANA FRANCIPANE, ; GUSTAVO FRECHTEL, ; IRENE SZIJAN

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LI Reunión de la SAIC y de la SAI; 2006

72. (645) DISTROFIA MUSCULAR DE DUCHENNE / BECKER: DIAGOSTICO MOLECULAR DIRECTO. FERREIRO Verónica, GILIBERTO Florencia, SZIJAN Irene. Cátedra de Genética y Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica. Hospital de Clínicas “José de San Martín”. UBA. La distrofia muscular de Duchenne (DMD) es una de las enfermedades hereditarias más frecuentes (1:3500). Es recesiva, ligada al X, con síntomas clínicos progresivos y de evolución fatal. La distrofia muscular de Becker (DMB) es menos frecuente y más leve. Las DMD/DMB se deben a mutaciones, principalmente grandes deleciones, en el gen de la distrofina (locus Xp21). La diferencia molecular entre las DMD/DMB es la presencia (DMD) o ausencia (DMB) de corrimiento del marco de lectura. Se realizó un estudio molecular directo en 316 pacientes con diagnóstico clínico de la patología y en 7 mujeres portadoras sintomáticas de DMB. La identificación de la deleción en varones se realizó por PCR multiplex, utilizando 4 reacciones cuadruplex para la amplificación de 16 exones. La confirmación de la presencia de una deleción y el análisis de su extensión se realizó por medio de PCR simplex de los exones faltantes y de los contiguos a los mismos. Se verificó la conservación del marco de lectura mediante el análisis de la secuencia resultante luego del empalme de los exones flanqueantes a la deleción. Con este diagrama de trabajo se pudieron no solo confirmar los diagnósticos clínicos de 149 pacientes sino también interpretar las consecuencias fenotípicas de las alteraciones moleculares halladas en 92 de ellos. El estudio de elección para el rastreo de deleciones en mujeres portadoras sintomáticas se basó en el análisis de la segregación de hasta 11 STRs intragénicos, hallándose deleciones en 2 de las 7 mujeres analizadas. Circunstancialmente el estudio de STRs también permitió evidenciar deleciones en varones. Se quiere demostrar la importancia del hallazgo y caracterización de deleciones en pacientes con DMD, con el objeto de conocer la alteración que dio origen al fenotipo patológico, para poder acceder en un futuro a la corrección específica del defecto genético de cada afectado en particular.