Capacidad de Lactiplantibacillus plantarum LP5 para inhibir biopelículas de Campylobacter coli

RUIZ, JULIA; SIRINI, NOELÍ; ACOSTA, FEDERICO; OLIVERO, CAROLINA; MARTI, ENRIQUE; ROSMINI, MARCELO; SIGNORINI, MARCELO; FRIZZO, LAUREANO

Esperanza, Santa Fe

Jornada; IX JORNADA DE DIFUSIÓN DE LA INVESTIGACIÓN Y EXTENSIÓN; 2021

FCV-UNL

Campylobacter termotolerantes (CT) forma parte de la microbiota del tracto gastrointestinal de los animales productores de alimentos, principalmente las aves de corral. Si bien CT no logra sobrevivir en el aire atmosférico por más de unas pocas horas, se cree que desarrolla estrategias de adaptación para permanecer en estas condiciones, tales como la formación de biopelículas4. Las biopelículas pueden formarse sobre diferentes materiales como vidrio, nailon, aluminio, madera, plástico, acero inoxidable e incluso sobre los alimentos y pueden persistir frente a los procesos de limpieza y desinfección1. CT tienen la capacidad de formar biopelículas en los equipos e instalaciones de cría y plantas de procesamiento de animales3. Las biopelículas formadas por bacterias ácido lácticas (BAL) pueden ser utilizadas para reducir patógenos2. Este enfoque prometedor basado en el principio de exclusión competitiva permitiría colonizar superficies con el fin de contrarrestar la proliferación y establecimiento de bacterias patógenas. El objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad inhibitoria de Lactiplantibacillus plantarum LP5 frente a Campylobacter coli en ensayos de formación de biopelículas in vitro y exclusión competitiva. La formación de biopelículas por C. coli NCTC11366, C. coli DSPV458, C. coli DSPV541 y C. coli DSPV570 fue evaluada mediante medición de la densidad óptica (DO). En una placa de valoración de poliestireno estéril de 24 pocillos fueron colocados 2 ml de caldo MH (Muller Hinton, Biokar, Francia) y 200 µl de una suspensión bacteriana ajustada a 0,25±0,05 (A600nm) en MH (Biokar, Francia). La placa fue incubada en microaerofilia durante 72 h a 42°C. El medio fue retirado de los pocillos y estos fueron lavados con 2 ml de agua destilada estéril. Las bacterias adheridas fueron fijadas con 2 ml de metanol (Anedra, Argentina) durante 15 min. Las placas fueron vaciadas, secadas a temperatura ambiente y teñidas con 2 ml de cristal violeta (Anedra, Argentina) al 2% (v/v) por pocillo. El colorante fue enjuagado y la tinción de las células adherentes fue liberada con 2 ml de ácido acético glacial al 33% (v/v). Finalmente fue medida la DO de cada pocillo a 600 nm usando un lector de placas (CLARIOstar®Plus, BMG LABTECH, Argentina). El control negativo fue realizado en pocillos conteniendo caldo MH (Biokar, Francia) sin inocular. Las cepas fueron clasificadas como: no formadoras de biopelículas (NF): DO≤CDO, débiles formadoras de biopelículas (DF): CDO