IDENTIFICACIÓN DE SUSTANCIAS INHIBIDORAS SIMILARES A BACTERIOCINAS PRODUCIDAS POR Lactiplantibacillus plantarum LP5

RUIZ, MARÍA JULIA; GARCÍA MAURO; KRÜGER, ALEJANDRA; PADOLA NORA LÍA; MEDINA CANALEJO LM; ANALÍA ETCHEVERRÍA

Tandil

Congreso; IICONGRESODE MICROBIOLOGÍAVETERINARIA. Un pilar en el marco una salud; 2023

FCV-UNCPBA

En la industria alimentaria, existe un interés creciente por el uso de agentes antimicrobianosnaturales para controlar o inhibir el crecimiento de patógenos. Las bacteriocinas son uno de losposibles candidatos. Actualmente, la nisina y la pediocina son las únicas bacteriocinas aprobadaspara uso industrial alimentario. Sin embargo, existe una constante búsqueda y caracterización debacterias potencialmente productoras de bacteriocinas. Lactiplantibacillus plantarum produce variostipos de bacteriocinas de clase IIb como las plantaricinas PlnE, PlnF, PlnJ y PlnK. Estos péptidostienen actividad bactericida independiente, que se potencia cuando interactúan en pares formandolos complejos de poración E/F y J/K. El objetivo del presente trabajo fue identificar sustanciasinhibidoras similares a las bacteriocinas producidas L. plantarum LP5. La sensibilidad de lassustancias antimicrobianas de L. plantarum LP5 se ensayó por tratamiento con NaOH, catalasa yproteinasa K mediante la prueba de difusión en pozo utilizando STEC EDL933 como cepaindicadora. La presencia de genes codificantes de plantaricina específicos se evaluó mediante PCRcon cebadores diseñados con las secuencias de plantaricina E/F y J/K disponibles en GenBank yutilizando la plataforma Primer3Plus. La presencia de ARNm de genes que codifican plantaricinasy los cDNAs fueron analizados por PCR. La secuenciación del genoma completo se obtuvo porMicrobesNG. El genoma de referencia más cercano se identificó con KRAKEN, las lecturas semapearon con BWA mem y se ensamblaron con SPADES. El ADN secuenciado también se analizóutilizando BAGEL4 que identifica ORF putativos de bacteriocina en una secuencia de ADN. Laprueba de difusión de pozo mostró que las bacteriocinas producían efectos inhibidores. La PCRpermitió la detección de genes que codifican las plantaricinas E/F y J/K. Fue posible identificar elARNm correspondiente a PlnE, PlnF, PlnJ y PlnK. El análisis del genoma completo identificóplantaricinas E/F y J/K en una estructura de operón con sus correspondientes proteínas deinmunidad y transporte, además de las plantaricinas A y N. Podemos concluir que el efectoinhibitorio de L. plantarum LP5 se asocia con la producción de plantaricinas, generando un interéspara su aplicación como potencial cepa probiótica.