Uso del E-test para detectar resistencia a penicilina y cefalosporinas de amplio espectro en cepas de Streptococcus pneumoniae

BOGADO, I; EBNER, G; VERDINI, RA; SUTICH, E

Buenos Aires, Argentina

Congreso; I Congreso Internacional de Infectología y Microbiología Clínica; 1997

Asociación Argentina de Infectología SADI y Asociación Argentina de Bacteriología SADEBAC

La determinación de susceptibilidad antibiótica en cepas de Streptococcus pneumoniae clínicamente significativas se ha vuelto critica en los últimos años debido a la aparición de cepas resistentes a penicilina (PEN) y otros antimicrobianos. La prueba de screening con discos de oxacilina (OXA) de 1 mg ha demostrado ser de buena utilidad para predecir sensibilidad a PEN para resultados ~ 20 mm, pero en el caso de cepas con halo ~ 19 mm se requiere la determinación de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) PEN y cefalosporinas de amplio espectro, utilizadas como alternativa terapéutica. El método recomendado por el National Committee for Laboratory Standars (NCCLS), USA, es mediante dilución en caldo MuelIer-Hinton suplementado con 2-5% de sangre lisada de caballo, el cual resulta tedioso para preparar y de difícil accesibilidad. El otro método alternativo es la dilución en agar Mueller-Hinton con 5% de sangre de camero, el cual no resulta práctico para aislamientos únicos, por lo cual ambos, métodos no son adecuados, ni para la rutina del laboratorio de microbiología, ni para solucionar un problema crítico en 24h. De reciente aparición es el método de E-test (Prueba de epsilometría) el cual se presenta como una alternativa válida para superar los inconvenientes anteriores. Nuestro objetivo fue evaluar la utilidad del método E-test para determinar CIM de PEN, cefotaxima (CFX) y ceftriaxona (CRO),comparándolo con el método de referencia por dilución en agar. Se estudiaron un total de 42 cepas de S. pneumoniae seleccionadas de tal manera de tener una distribución adecuada de cepas sensibles (S), relativamente resistentes (RR) y resistentes (R) a PEN, pero que no representan un porcentaje de resistencia particular en la población total. Todas las cepas se identificaron por coloración de Gram-Nicolle, morfología de la colonia, susceptibilidad a la optoquina y solubilidad en bilis. La determinación de la CIM para PEN, CTX yCRO se realizó por el método de dilución en agar según normas de la NCCLS y por el método de E-test (AB Biodisk, Solna, Suecia) siguiendo las instrucciones del fabricante. Los valores obtenidos por este último método fueron ajustados a la concentración superior que coincida con la CIM log2 del método de dilución. Se emplearon como cepas controles: E. faecalis ATCC 29212, S. pneumoniae ATCC 49619 y Staphylococcus aureus ATCC 25923. Debido a que se ha obtenido una buena concordancia entre ambos métodos se puede concluir que el E-test es una alternativa confiable, simple y rápida para detectar resistencias en cepas de S. pneumoniae, en las cuales el concepto microbiológico de resistencia esta íntimamente relacionado con el concepto clínico de falla terapéutica, especialmente en los casos de infección meníngea.