METABOLITOS DE CORDYCEPS TENUIPES INHIBIDORES DE FACTORES DE VIRULENCIA DE PSEUDOMONAS AERUGINOSA OBTENIDOS BAJO DIFERENTES CONDICIONES DE CULTIVO

GALLO C.; CONTINO G; VIOLA MC; LOTO FV; LOPEZ LASTRA CC; CARTAGENA, ELENA; ARENA, M.E.; ALBERTO M. R.

San Miguel de Tucuman

Jornada; III Jornadas de Microbiología sobre Temáticas Específicas del NOA MICROBIOLOGÍA AGRÍCOLA Y AMBIENTAL; 2019

Asociacion Argentina de Microbiologia

Isaria tenuipes Peck, hongo anamorfo del género Cordyceps, crece parasitando principalmente larvas y pupas de Lepidópteros. Debido a su hábito entomopatógeno ha sido ampliamente estudiado para su aplicación en el control de plagas agrícolas. También se le atribuyen múltiples propiedades beneficiosas para la salud difundidas en la medicina popular oriental, lo que convierte en una interesante fuente para la exploración de nuevos fármacos. Se sabe que las condiciones de cultivo influyen en los tipos de metabolitos que se biosintetizan y sus concentraciones relativas. En este trabajo se realizó un estudio comparativo de metabolitos biológicamente activos producidos por Isaria tenuipes (CEP 445) perteneciente a la colección del CEPAVE. La cepa fue cultivada durante 25 días, a 28 °C y 180 rpm, bajo dos condiciones: medio (papa- glucosa) enriquecido al 2% con restos de insecto (larvas de Spodoptera frugiperda) (H+I) y medio no-enriquecido (H). Se separaron los sobrenadantes del micelio, y se sometieron a extracciones sucesivas con acetato de etilo (AcOEt) y etanol (EtOH). Sobre los ocho extractos obtenidos: micelio H (MH AcOEt y EtOH); micelio H+I (MH+I AcOEt y EtOH); sobrenadante H (SH AcOEt y EtOH) y sobrenadante de H+I (SH+I AcOEt y EtOH), se evaluó la capacidad de inhibir el crecimiento, movilidad (swarming y swimming) y la actividad anti-QS de dos cepas de Pseudomonas aeruginosa (PA01 y PA14). En ningún caso los extractos mostraron efecto sobre el crecimiento en las concentraciones ensayadas (hasta 1000 µg/ml). Se observó un efecto inhibitorio de todos los extractos (500 µg/ml) en el swimming de PA01, siendo SH+I AcOEt y EtOH los más activos con porcentajes de inhibición de 52% y 50%, respectivamente. Para PA14 la mayor actividad se vio en SH AcOEt (64%) y MH+I EtOH (50%). En cuanto a la motilidad swarming la mayoría de los extractos fueron activos con porcentajes de inhibición entre 31% y 78 % para PA01 y entre 37 y 95% para PA14. La capacidad anti-QS se determinó en el microorganismo sensor Chromobacterium violaceum CV026 enfrentándolo a 3 dosis de los diferentes extractos: 1, 2 y 4 mg. Todos los extractos de H exhibieron actividad desde la dosis más baja, observándose un efecto bactericida en la dosis de 2mg para SH AcOEt y de 4mg para MH EtOH, SH AcOEt y SH EtOH. Todos los extractos H+I mostraron inhibición de QS en las dosis de 2 y 4 mg, y en la dosis de 1mg lo hicieron SH+I EtOH y MH+I EtOH. Los resultados muestran que Isaria tenuipes produjo metabolitos capaces de inhibir factores de virulencia de Pseudomona aeruginosa, y que la presencia de insecto en el medio indujo un cambio metabólico en Isaria tenuipes lo que se tradujo en una expresión diferente de las actividades biológicas ensayadas.