Evaluación de un método de análisis digital de imágenes para cuantificar fracciones electroforéticas de hemoglobina

MONZÓN GENEYRO, EVANGELINA; FLORES, EZEQUIEL; TOÑANES, CYNTHIA A; IVÁN MA. VICTORIA; GUEVARA, MA. CRISTINA; OJEDA, GONZALO A

RESITENCIA - CHACO

Congreso; PRIMER CONGRESO BIOQUÍMICO DEL NEA; 2012

COLEGIO DE BIOQUÍMICO DEL NEA

La electroforesis de hemoglobina a pH alcalino es un examen que permite identificar varios tipos de ella y es probablemente el método de laboratorio de más ayuda para separar y medir hemoglobinas normales y ciertas anormales. Las técnicas tradicionales de cuantificación presentan el inconveniente de ser engorrosas y poco reproducibles. El análisis digital de imágenes es una herramienta utilizada para evaluar objetivamente el color mediante el análisis de varios parámetros como ser la luminosidad (L*) que indica cuan luminosa es una superficie, el parámetro a* que mide variaciones de color de rojo a verde y el parámetro b* que mide las variaciones de azul a amarillo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar una técnica de análisis digital de imágenes para la cuantificación de fracciones electroforéticas de hemoglobinas. Se realizó la electroforesis de hemoglobinas en medio alcalino de 20 muestras por duplicado, la misma se realizó siguiendo la técnica propuesta por Dacie y Lewis utilizando como colorante Amido Schwarz. Un grupo de duplicados se eluyó con ácido acético 80% y se leyó su absorbancia a 630 nm. Los restantes fueron transparentizados con metanol: ácido acético: glicerol (85:14:1), colocados sobre placa de vidrio y llevados a estufa a 100°C por 30 s. Para la obtención de imágenes digitales se utilizó un scanner (HP deskjet F4180). Las imágenes así obtenidas fueron evaluadas con el software Adobe Photoshop® 8.0.1 registrándose el parámetro L para las fracciones visibles. Los datos obtenidos fueron analizados con el software estadístico InfoStat realizando análisis de correlación y regresión, siendo y=%Hb y x=L*. Se obtuvo una correlación lineal (y=-1.4675x + 189.33) que presentó un r^2=0.918 lo que indicaría una buena correlación de variables. También se obtuvieron regresiones exponenciales (y=379.05 x^-0.4418) con r^2= 0.895 y logarítmicas (y= - 45.274 ln (x) + 258.25) con r^2= 0.924. Se puede concluir que para las muestras analizadas en las condiciones especificadas se podrían emplear datos de análisis digital de imágenes y extrapolarlos de modo lineal a los valores de elución. Sin embargo para valores intermedios de las variables, es decir, aquellos que se podrían hallar en situaciones patológicas, se podría evaluar la factibilidad de usar regresiones exponenciales o logarítmicas.