Modelo murino de colonización con Campylobacter coli DSPV458

RUIZ, M.J.; WERNING, L; ZIMMERMANN, J.A.; ZBRUN, M.V.; OLIVERO, C.R.; SEQUEIRA, G.J.; FRIZZO, L.S.

Revista Fave Ciencias Veterinarias

UNL

Año: 2020

1666-938X

La campilobacteriosis es una zoonosis, transmitida al ser humano por los animales o por productos deorigen animal. Campylobacter coli es una de las principales especies patógenas para los humanos1. Escapaz de infectar/colonizar una variedad de especies hospedadoras. El control en la producción primariamediante la disminución de la colonización en los animales de abasto reduciría la prevalencia de estaenfermedad en humanos3. No obstante, el estudio de la relación huésped-Campylobacter aún no estádefinida con certeza. Esta limitación se debe a la ausencia de hallazgos clínicos o patológicosconsistentes en modelos de animales de laboratorio2. El objetivo de este trabajo fue generar un modeloexperimental murino de colonización por Campylobacter coli DSPV458. El modelo fue evaluado en 24ratones adultos Balb/cCmedc, hembras de 6 sem de edad (CMC-ICiVet-Litoral, CONICET-UNL) yaprobado por el Comité Asesor de Ética y Seguridad (C.A.E.S, FCV-UNL), protocolo 940/19. Losratones fueron alojados en dos grupos de 12 animales: grupo tratado (G-T) y grupo control (G-C), a 22-24°C, 55±15% de HRA, ciclo de 12 h luz/12 h oscuridad y suministrados con agua y alimento ad libitumdurante todo el experimento (21 d). La colonización fue facilitada mediante un tratamiento conenrofloxacina, florfenicol, trimetoprim sulfametoxazol y oxitetraciclina en agua de bebida durante 5 d.Dos días después de retirados los antibióticos, los dos grupos recibieron 0,1 ml de NaHCO3 (5% p/v).Pasados 15 min, el G-T fue administrado con 0,1 de 6,68log10CFU de C. coli DSPV458 suspendido enBHI y el G-C con 0,1 ml del mismo medio. Diariamente, fue realizado un examen de los signos clínicosde los animales y a intervalos semanales (días 0, 7, 14 y 21), muestreos fecales de todos los animales ynecropsias de tres animales por grupo. Cada muestra fecal de 0.1 g fue homogeneizada en 9.9 ml desolución de NaCl (0.85% v/v) y cultivada en mCCDA para recuento de C. coli DSPV458. Las necropsiasfueron realizadas en los ratones previamente anestesiados por vía subcutánea (ketamina, xilazina yacepromacina) y sacrificados por dislocación cervical. Las muestras de sangre obtenidas por extracciónintracardiaca fueron homogeneizadas con EDTA al 10% (v/v) para el estudio de hemograma. Latranslocación al medio interno y la colonización intestinal se evaluaron en bazo e hígado e íleon y ciego,respectivamente. Estas muestras fueron homogeneizadas en 9,9 ml de solución de NaCl (0,85% v/v) ycultivadas para cuantificar C. coli DSPV458, bacterias ácido lácticas, E. coli, bacterias β-glucurónidenegativas, enterobacterias y levaduras. Inicialmente todos los ratones estaban libres de CT u organismosrelacionados. El tratamiento con antibióticos generó un desequilibrio en la microbiota murina. C. coliDSPV458 se aisló de todos los ratones infectados a partir de su administración hasta el final del ensayo.Los niveles en muestras fecales oscilaron entre 6.67 y 7.5 logUFC/g. La colonización se produjoprincipalmente en el ciego (media de 7.97 logUFC/g) y una cantidad menor en íleon (media de 4.24logUFC/g). Todas las muestras intestinales mostraron diferencias significativas en los niveles de C. coliDSPV458 entre T-G y C-G. Las poblaciones microbianas estudiadas en ciego e íleon no mostrarondiferencias entre T-G y C-G. No hubo evidencia de enfermedad, diarrea marcada, comportamientoanormal ni muertes durante todo el ensayo. El estudio de hemograma mostró valores normales para laespecie, cepa, edad y sexo en todos los ratones analizados. El modelo presentado proporciona unaherramienta novedosa para el desarrollo de alternativas de control de patógenos involucrados enenfermedades transmitidas por alimentos presentes en los animales de abasto.