Detección de Escherichia coli productor de toxina Shiga en muestras de materia fecal bovina y agua ambiental.

TANARO J.D., ; LEOTTA G.A., ; LOUND L.H., ; GALLI L., ; LEDRI S.E., ; CARBONARI C., ; PIAGGIO M.C., ; RIVAS M.

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos.; 2006

Escherichia coli productor de toxina de Shiga (STEC) es un patógeno diarreigénico, productor de síndrome urémico hemolítico (SUH). En Argentina el SUH es una enfermedad endémica y tiene un alto impacto en Salud Pública. STEC es constantemente reintroducido a la cadena alimenticia desde su principal reservorio, el ganado bovino, cumpliendo el agua un papel crítico en la colonización del ganado. El objetivo del trabajo fue determinar la frecuencia de STEC en el ganado bovino y en los cursos de agua presentes en el área de cría. Entre septiembre de 2005 y agosto de 2006, se colectó un total de 288 muestras de bovinos, y 32 muestras de los cursos de agua del establecimiento rural de cría de los bovinos, en la ciudad de Gualeguaychú. Las muestras de bovinos se obtuvieron mediante hisopados rectales y las de agua con hisopos de Moore. Para el aislamiento de STEC no-O157 se sembraron las muestras rectales en placas de agar MacConkey. Posteriormente, los hisopos se incubaron a 42ºC por 24 h en 15 ml de caldo EC modificado con novobiocina (ECm+N) para el aislamiento de E. coli O157:H7/NM. Luego se realizó la metodología basada en la separación inmunomagnética. Los hisopos de Moore se colocaron en los cursos de agua durante 24 h. Para el aislamiento de E. coli O157:H7/NM la mitad de los hisopos se incubaron a 42ºC por 24 h en 100 ml de caldo ECm+N. La otra mitad de los hisopos fue incubada a 37ºC por 24 h en 100 ml de caldo EC, posteriormente se sembraron 50 l por agotamiento en agar MacConkey para el aislamiento de STEC no-O157. La búsqueda de STEC se realizó mediante PCR múltiple (stx1, stx2, y rfbO157). Los aislamientos stx y/o rfbO157 positivos fueron caracterizados feno-genotipicamente mediante pruebas bioquímicas y la detección de los genes eae, saa y ehxA. Sobre 288 muestras bovinas, 132 (45,8%) fueron positivas para los genes stx y/o rfbO157. De ellas se aislaron 116 cepas: 61 (52,5%) stx2, 28 (24,2%) stx1, 21 (18,2%) stx1/stx2, 3 (2,6%) stx1/stx2/rfbO157, 2 (1,7%) stx2/rfbO157, y 1 (0,8%) rfbO157. Entre estas cepas 33 portaron los genes saa y ehxA, 21 los genes eae y ehxA, 8 el gen saa, 4 el gen eae y 2 el gen ehxA. Sobre 32 muestras de agua ambiental, 19 (59,4%) fueron positivas para los genes stx y/o rfbO157. De ellas se aislaron 9 (28,1%) cepas: 4 (44,4%) rfbO157, 2 (22,2%) stx2/rfbO157, 2 (22,2%) stx2, y 1 (11,2%) stx1/stx2. Entre estas cepas 2 portaron los genes eae y ehxA, y 2 el gen saa. Se demostró que los bovinos criados en Gualeguaychú poseen una alta prevalencia de STEC en la materia fecal. Debe profundizarse en el conocimiento del reservorio y en el movimiento de genes transferidos entre las cepas animales y ambientales.