Relación clonal de cepas de Escherichia coli O157:H7/NM aisladas de bovinos.

TANARO J.D., ; LEOTTA G.A., ; LOUND L.H., ; GALLI L., ; LEDRI S.E., ; CARBONARI C.C., ; PIAGGIO M.C., ; RIVAS M.

Córdoba

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología.; 2007

Escherichia coliO157:H7 es un patógeno emergente asociado a brotes de Enfermedades Transmitidas por Alimentos, y el ganado bovino es su principal reservorio. La electroforesis de campos pulsados (PFGE) permite observar el polimorfismo genético existente en una población bacteriana mediante el análisis de los patrones de restricción del ADN genómico. Se considera que PFGE es la técnica de oro para la subtipificación de E. coliO157:H7/NM, particularmente en el contexto de estudios epidemiológicos. Los objetivos del trabajo fueron aislar y caracterizar cepas de E. coliO157:H7/NM productor de toxina Shiga en bovinos de engorde en un establecimiento del Departamento Gualeguaychú, y establecer la relación clonal por PFGE. Entre los años 2005 y 2006, se analizaron 288 muestras de hisopados rectales bovinos y se investigó la presencia de E. coli O157:H7/NM utilizando la técnica de separación inmunomagnética. Como tamizaje se utilizó una técnica de PCR múltiple para la detección de los genes stx1, stx2, y rfbO157. Las cepas aisladas fueron caracterizadas fenotípica y genotípicamente. La técnica de PFGE fue realizada según el protocolo estandarizado de la Red PulseNet (CDC, 2004) utilizando dos enzimas de restricción, XbaI y BlnI. La prevalencia de E. coliO157:H7/NM hallada en nuestro estudio fue de 3,5% (10/288). Las 10 cepas estudiadas fueron hemolíticas, no fermentaron el sorbitol, no presentaron actividad ß-glucuronidasa. Todas las cepas portaron los genes stx2c, eae, y ehxA; y 6 cepas portaron el gen stx1. Sobre un total de 10 cepas analizadas por XbaI-PFGE se establecieron 3 patrones de restricción los cuales presentaron entre 16 y 21 bandas bien definidas de 36 a 582 kb. Seis cepas aisladas entre mayo y julio de 2006 presentaron el patrón #1, 3 cepas aisladas en julio de 2006 presentaron el patrón #2, y una cepa aislada en abril de 2006 presentó el patrón #3. Los 3 patrones presentaron una similitud =75%. Las cepas de los patrones XbaI-PFGE #1 y #2 fueron indistinguibles al utilizar la segunda enzima BlnI, confirmándose la identidad observada por XbaI-PFGE. Se demostró la presencia de diferentes subtipos de E. coliO157:H7/NM en un mismo establecimiento rural, como así también la persistencia de un clon en el rodeo durante 3 meses. El conocimiento de los clones circulantes en el ganado podría orientar al diseño de estrategias de control.