Lipopolímeros catiónicos y su interacción con DNA plasmídico.

C. FACUNDO TEMPRANA, M. SILVIA AMOR, MARIA C. TAIRA Y SILVIA DEL V. ALONSO

La Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Biofísica, XXXVII Reunión Nacional Anual; 2008

Sociedad Argentina de Biofisica

En el presente trabajo se evaluó la forma de adicionar al lipopolímero compuesto por 1,2-bis (10,12-tricosadiinoil)-sn-glicero-3-fosfatidilcolina:1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (DC8,9PC:DMPC 1:1) una carga positiva mediante la incorporación de los lípidos catiónicos: 1,2-dioleoil-3-trimetilamonio-propano (DOTAP), estearilamina (SA) y trimetil(2-miristoiloxietil)amonio (MCl). Se determinó la influencia de la carga positiva sobre la polimerización y el tamaño de vesícula logrado. Se realizaron ensayos de retardo de movilidad en gel de agarosa con los plásmidos pCH110 (7128 pb) y pDsRed2-N1 (4692 pb) para determinar la relación óptima lipolímero catiónico/DNA plasmídico, a la cual todo el DNA es complejado y se evaluó el tamaño de dichos complejos mediante light scattering. La polimerización no se vio afectada por el agregado del lípido catiónico en la formulación en una relación de DC8,9PC:DMPC:X de 1:1:0,2, donde X es DOTAP, SA o MCl. El agregado del lípido catiónico a DC8,9PC:DMPC (1:1) previamente polimerizado, dio lugar a vesículas de mayor tamaño que el caso de los co-polimerizados. Los complejos obtenidos presentaron un tamaño comprendido entre los 900 y 1800 nm de diámetro. Las relaciones óptimas lipopolímero/DNA plasmídico fueron de 8:1 para el caso de pCH110  con DC8,9PC:DMPC:DOTAP o MCl y de 12:1 para el caso de pDsRed2-N1 con DC8,9PC:DMPC:DOTAP o MCl.