Determinación de las vías metabólicas que intervienen en la biotransformación hepática de flubendazole.

MATÉ, L.; VIRKEL, G.; LIFSCHITZ, A.; BALLENT, M.; SALLOVITZ, J.; LANUSSE C.

General Pico, La Pampa

Jornada; XII Jornadas Latinoamericanas y XVII Nacionales de Fármaco-toxicología; 2007

AAFAVET

INTRODUCCIÓN. Flubendazole (FLBZ) es un antihelmíntico benzimidazole frecuentemente utilizado en producción avícola y porcina, cuyo desarrollo para uso en rumiantes se encuentra bajo evaluación. Tanto en el hígado como en el tracto gastrointestinal, FLBZ puede ser biotransformado mediante una hidrólisis y/o una reducción, convirtiéndose en FLBZ hidrolisado (H-FLBZ) o FLBZ reducido (R-FLBZ), respectivamente (Nobilis et al., 2007). La formación de R-FLBZ a partir de FLBZ fue observada tanto in vivo como in vitro en ovinos (Moreno et al., 2004). La formación de R-FLBZ podría ser consecuencia de la actividad metabólica de cetonas-reductasas, como ha sido previamente descripto para mebendazole (Gottmanns et al., 1991). FLBZ podría ser una alternativa para el tratamiento antihelmíntico en rumiantes y la modulación de la actividad de las enzimas involucradas en su metabolismo podría ser determinante de su comportamiento farmacológico. El objetivo del presente trabajo fue estudiar in vitro las vías metabólicas que participan en el metabolismo de este fármaco antihelmíntico. MATERIALES y MÉTODOS. Microsomas hepáticos fueron obtenidos de ovinos Corriedale (n=4) y de ratas Wistar hembra controles (n= 2) y tratadas con fenobarbital (FBBT) (n=2), conocido agente inductor enzimático, disuelto en el agua de bebida durante una semana. Todas las fracciones microsomales fueron incubadas con FLBZ y R-FLBZ en presencia de NADPH (cofactor) en aerobiosis a 37 °C durante 30 min. Además, los microsomas hepáticos de ratas fueron incubados con diferentes sustratos marcadores de la actividad y de la expresión de diferentes isoformas del sistema enzimático citocromo P450 (CYP): eritromicina (ETM) y triacetiloleandomicina (TAO) N-desmetilasa (CYP 3A); aminopirina (AMINOP) y clorfeniramina (CLOR) N-desmetilasa (CYP 2C). Cada sustrato fue incubado en presencia de un sistema regenerativo de NADPH (NADP+ 0.32 mM, glucosa-6-fosfato 6.4 mM, MgCl2 5 mM, EDTA 0.8 mM y 1.25 U de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa en Tris-HCl 0.1 M, pH 7.4) y de 1 mg de proteína microsomal. La cantidad de formaldehído liberado fue determinada fluorimétricamente en una alícuota del sobrenadante de la reacción metabólica incubada con el reactivo de Nash (Werringloer, 1978). RESULTADOS y DISCUSIÓN. La inducción enzimática por FBBT fue corroborada mediante la determinación de las actividades metabólicas N-desmetilasa mediadas por las isoformas CYP 3A y 2C (Tabla 1). La oxidación de R-FLBZ a FLBZ fue mayor (~5 veces) en microsomas hepáticos de ratas tratadas con FBBT (Tabla 1). Esto sugiere que la oxidación de R-FLBZ en rata es CYP-dependiente. Por el contrario, la actividad R-FLBZ oxidasa no fue detectada en microsomas hepáticos ovinos. Una elevada capacidad reductora de FLBZ fue observada en microsomas hepáticos de ovinos en comparación con los de rata (Tabla 2). Esta observación coincide con la ausencia de actividad de cetona-reductasas en microsomas hepáticos de ratas (Hermans y Thijssen, 1989). Estos son resultados preliminares de una serie de estudios orientados a la caracterización de las vías metábolicas implicadas en el metabolismo  de FLBZ y otros fármacos en diferentes especies animales. Se trata de continuar con el desarrollo de estrategias metodológicas para estudiar la biotransformación de xenobióticos, área que en nuestro laboratorio fue puesta en marcha hace algunos años. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Gottmanns et al. Xenobiotica. 1991; 21: 1431-1439. Hermans y Thijssen. Biochemical Pharmacology. 1989; 38: 3365-3370. Moreno et al. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics. 2004; 27: 299-308. Nobilis et al. Journal of Chromatography A. 2007; 1149: 112-120. Werringloer (1978). Methods in Enzymology C. 1978; 52, 297?302.