IDENTIFICACIÓN DE SUSTANCIAS INHIBIDORAS SIMILARES A BACTERIOCINAS PRODUCIDAS POR Lactiplantibacillus plantarum LP5

RUIZ, MARÍA JULIA; GARCÍA, MAURO DANIEL; KRÜGER ALEJANDRA; PADOLA NORA L.; MEDINA CANALEJO, LUIS MANUEL ; ETCHEVERRÍA ANALÍA I.

Tandil

Congreso; II CONGRESO DE MICROBIOLOGÍA VETERINARIA; 2023

Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires

En la industria alimentaria, existe un interés creciente por el uso de agentesantimicrobianos naturales para controlar o inhibir el crecimiento de patógenos. Lasbacteriocinas son uno de los posibles candidatos. Actualmente, la nisina y la pediocina sonlas únicas bacteriocinas aprobadas para uso industrial alimentario. Sin embargo, existeuna constante búsqueda y caracterización de bacterias potencialmente productoras debacteriocinas. Lactiplantibacillus plantarum produce varios tipos de bacteriocinas de claseIIb como las plantaricinas PlnE, PlnF, PlnJ y PlnK. Estos péptidos tienen actividadbactericida independiente, que se potencia cuando interactúan en pares formando loscomplejos de poración E/F y J/K. El objetivo del presente trabajo fue identificar sustanciasinhibidoras similares a las bacteriocinas producidas L. plantarum LP5. La sensibilidad delas sustancias antimicrobianas de L. plantarum LP5 se ensayó por tratamiento con NaOH,catalasa y proteinasa K mediante la prueba de difusión en pozo utilizando STEC EDL933como cepa indicadora. La presencia de genes codificantes de plantaricina específicos seevaluó mediante PCR con cebadores diseñados con las secuencias de plantaricina E/F yJ/K disponibles en GenBank y utilizando la plataforma Primer3Plus. La presencia de ARNmde genes que codifican plantaricinas y los cDNAs fueron analizados por PCR. Lasecuenciación del genoma completo se obtuvo por MicrobesNG. El genoma de referenciamás cercano se identificó con KRAKEN, las lecturas se mapearon con BWA mem y seensamblaron con SPADES. El ADN secuenciado también se analizó utilizando BAGEL4 queidentifica ORF putativos de bacteriocina en una secuencia de ADN. La prueba de difusión depozo mostró que las bacteriocinas producían efectos inhibidores. La PCR permitió ladetección de genes que codifican las plantaricinas E/F y J/K. Fue posible identificar elARNm correspondiente a PlnE, PlnF, PlnJ y PlnK. El análisis del genoma completoidentificó plantaricinas E/F y J/K en una estructura de operón con sus correspondientesproteínas de inmunidad y transporte, además de las plantaricinas A y N. Podemos concluirque el efecto inhibitorio de L. plantarum LP5 se asocia con la producción de plantaricinas,generando un interés para su aplicación como potencial cepa probiótica