Adsorción de enterocinas sintetizadas por Enterococcus faecium CRL1385 sobre diferentes soportes inorgánicos

IBARGUREN, CAROLINA; FARFÁN, MÓNICA; AUDISIO, M. CARINA; APELLA, M.CRISTINA

Tucumán, Argentina

Simposio; II Argentinean -Italian Symposium on Lactic Acid Bacteria; 2004

Centro de Referencias para Lactobacilos

Las bacteriocinas producidas por bacterias lácticas se han convertido, en los últimos años, en potenciales biopreservadores de productos alimenticios para el hombre porque pueden inhibir la microflora patógena sin tornarla resistente y sin alterar las propiedades organolépticas de los alimentos. Sin embargo, su aplicación se ve limitada no sólo por la cantidad que se precisaría sino también por su recuperación, con actividad, del medio de cultivo donde fue sintetizada. En este trabajo, se estudia la adsorción de las enterocinas producidas por E. faecium CRL1385 sobre diferentes silicatos. A partir de un cultivo de 6 h de E. faecium en LAPTg caldo a 37ºC y sin control de atmósfera, se preparó una solución madre de enterocinas con un título de 5.565 UAmL-1, determinado por el método de las diluciones seriadas con Listeria monocytogenes 01/155 como cepa indicadora. Como soportes inorgánicos, se utilizaron los silicatos perlita y zeosil, cuyas áreas superficiales se determinaron por el métoto de Brunauer, Emmet y Teller (BET). Los grupos silanol de los soportes fueron caracterizados por espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FTIR). La adsorción de las bacteriocinas se estudió en función del tiempo de contacto, el pH de la solución de enterocinas y la masa del adsorbente. También se analizó el efecto de la inmovilizacion de las enterocinas sobre su capacidad para inhibir L. monocytogenes. Para ello, se preparó una capa uniforme de adsorbente con enterocinas, y se la puso en contacto con una suspensión de células de listeria (ca. 2 × 108 UFCmL-1) durante 2, 4 y 24 h; se usó como control una capa de adsorbente hidratado en contacto con la suspensión de células de listeria. Se determinó la viabilidad celular por recuento en placa. Después de 2h de contacto a temperatura ambiente, la adsorción de las enterocinas sobre zeosil fue mayor que sobre perlita. Este resultado coincide con las propiedades de zeosil, que tiene un mayor número de silanoles totales y mayor área específica que la perlita (146 m2g-1 y 0,65 m2g-1 respectivamente) y también está de acuerdo con la interacción intraparticular y con el agua libre observados por FTIR. La adsorción de las bacteriocinas es pH dependiente; fue máxima en el intervalo de pH entre 4 y 8 y disminuyó considerablemente a un valor de pH < 4. La actividad antimicrobiana de las enterocinas frente a L. monocytogenes no se vio modificada por su adsorción sobre ninguno de los soportes; se observó total inhibición del patógeno luego de 2h en contacto con las bacteriocinas inmovilizadas tanto en zeosil como en perlita. Estos resultados permiten concluir que sería posible vehiculizar estas bacteriocinas, inmovilizadas en soportes inorgánicos como silicatos, sin pérdida de sus propiedades antimicrobianas.