Señales intracelulares activadas por bacterias probioticas o leches fermentadas en células inmunes asociadas a intestino

C. MALDONADO GALDEANO; A. DE MORENO DE LEBLANC; C. DOGI; E. CARMUEGA; R. WEILL; G. PERDIGON

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Cientifica de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica. LVII Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Inmunologia; 2009

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica y Sociedad Argentina de Inmunologia

Bacterias probióticas y leches fermentadas que contienen dichas bacterias (LFP) producen estimulación de células inmunes y de células epiteliales intestinales (CEI) con producción de citoquinas. Objetivo: determinar activación de calcineurina: vía NFAT y si el factor transcripcional NFkB esta involucrado en la producción de citoquinas (TNFa e IL-6) inducidas por bacterias probióticas y LFP. Comparar dicha activación con bacterias no probióticas y comensales. Estudiar las moléculas CD-80/86. CEI y placas de Peyer (PP) fueron aisladas de intestino delgado (ID) de ratones. Los cultivos celulares fueron tratados o no con un anti-NFkB para bloquear la vía y estimuladas posteriormente con: cepas probióticas Lactobacillus casei CRL431 (Lc) o Lactobacillus casei DN 111004 (Lc DN), o con una LFP conteniendo Lc DN o con bacterias no probióticas: Lactobacillus acidophilus heterólogo (La-hetero) o Lactobacillus acidophilus homologo (La-homo). En el sobrenadante de cultivo de CEI se determinó IL-6  y TNFa  en sobrenadante de células de PP por ELISA. La activación de calcineurina se realizó por IFI en cortes de ID. Las moléculas coestimuladoras CD-80/86  fueron analizadas por citometría de flujo en células de PP de ratones alimentados con las bacterias mencionadas durante 7 días o con la LFP durante 5 días. Demostramos que la producción de IL6 y de TNFa  fue dependiente de la vía NFkB. LFP estimuló IL6 no así el resto de las bacterias ensayadas (LFP 36±6 vs C16±0,6 pg/ml). Con respecto a TNFa, Lc, LCDN, La-hetero indujeron aumento (87, 109, 145 pg/ml respectivamente vs C 17±0.2) no así LFP (9±0,1) en células de PP. La activación de células calcineurina+ fue similar en todas las muestras ensayadas (17±3 vs C 11±2). La co-expresión de  CD80/86 fue estimulada por las cepas probióticas y LFP no así por las bacterias no probióticas. Estos resultados coinciden con estudios previos del laboratorio donde se demostró activación de la inmunidad innata por probióticos.