ANÁLISIS GENÉTICO/MOLECULAR DE UNA COHORTE ARGENTINA AFECTADA CON DISTROFINOPATÍA

LUCE, LEONELA; MAZZANTI, CHIARA; CARCIONE, MICAELA; SZIJAN, IRENE; GILIBERTO, FLORENCIA

Congreso; 72º Congreso Argentino de Bioquímica 2017; 2017

ANÁLISIS GENÉTICO/MOLECULAR DE UNA COHORTE ARGENTINA AFECTADA CON DISTROFINOPATÍA.Luce, Leonela1,2; Mazzanti, Chiara1,2; Carcione, Micaela1,2; Szijan, Irene1; Giliberto, Florencia1.2.1Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Genética. Buenos Aires, Argentina.2CONICET - Universidad de Buenos Aires, Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo (INIGEM). Buenos Aires, Argentina.Introducción: Las Distrofinopatías son enfermedades genéticas ligadas al cromosoma X causadas por mutaciones en el gen DMD. Se reconocen dos cuadros clínicos principales, Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) y de Becker (DMB). La DMD es una distrofia severa que afecta a 1:3500 niños nacidos vivos, en cambio DMB es más leve y afecta a 1:18000. Estas enfermedades se transmiten de manera hereditaria o familiar en 2/3 de los casos (más de 1 afectado en la familia), mientras que el 1/3 restante es producto de mutaciones de novo. Las alteraciones moleculares responsables de DMD/DMB son grandes deleciones en el 65% de los casos, grandes duplicaciones en el 5% y mutaciones puntuales en el 30% restante. Si bien hasta el momento no existe cura para estas graves patologías, comienzan a ingresar a nuestro país nuevos tratamientos de terapia génica que intentan mejorar la calidad de vida de estos pacientes. Estas terapias son mutación dependiente, Exon Skipping del exón 51 y Premature Stop Codon Read-through/Ataluren.Objetivos: La importancia de nuestro trabajo radica en realizar diagnósticos moleculares que permitan identificar individuos portadores, prevenir el nacimiento de nuevos afectados, y caracterizar las alteraciones moleculares para determinar si el paciente es candidato para alguna de las terapias hasta hoy desarrolladas. Materiales y métodos: Dado que no existe una técnica ?Gold standard?, desarrollamos un algoritmo diagnóstico para cada caso. Implementamos MLPA, PCR simplex, Secuenciación de Exoma Completo, Secuenciación de Sanger, Segregación de STRs y análisis predictivo con programas bioinformáticos (MutationTaster, SIFT, POLYPHEN-2, ESE-finder, Uniprot, Netgene2, etc). Resultados: En los últimos 6 años, hemos analizado aproximadamente 387 muestras de varones afectados y sus familias, incluyendo 14 muestras de vellosidades coriónicas. De los 155 niños con DMD/DMB, se identificaron deleciones/duplicaciones en el 52,3% y mutaciones pequeñas en el 21,3%. En cuanto a las terapias, 13 resultaron candidatos para Exon Skipping y 17 para Ataluren. Por otro lado, pudimos establecer como portador/afectado a 38/212 individuos y excluir de ser portadores a 101/212. Conclusiones: Los estudios que realizamos son de suma importancia para brindar asesoramiento genético a las familias que padecen está grave enfermedad. La caracterización de la mutación resulta esencial para la prognosis del paciente y determinar si aplica para alguna de las terapias génicas existentes. El trabajo que venimos realizando desde 1992, permite una completa caracterización de la población argentina con Distrofinopatía y contribuye a la comprensión de las bases genéticas/moleculares de estas severas enfermedades.Palabras clave: Distrofinopatía / Duchenne/Becker / Diagnóstico Molecular / Terapia Génica