Organum Vulgare (Oregano) inhibe la produccion de arginasa inducida por Helicobacter pylori en Macrofagos

AG SALINAS IBAÑEZ; F. CANALE , ; A.C. ARISMENDI SOSA, ; M.A. MATTAR, ; T. ALARCÓN,; A.E. VEGA

Valencia

Congreso; XVIII Congreso de la sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiologia Clinica; 2014

SEMIC

RESUMEN: Helicobacter pylori es una bacteria Gram-negativa microaerófila que coloniza el estómago humano y puede persistir toda la vida debido al mecanismo de evasión que desarrolla el microorganismo frente a la respuesta inmune del hospedador. H. pylori incrementa la producción de arginasa en macrófagos, que compite con la oxido nítrico sintetasa inducible (iNOS) por el sustrato L-arginina hidrolizándolo a urea y L-ornitina. Esta última es metabolizada para producir poliaminas y H2O2 que inducen apoptosis del macrófago evitando la destrucción del Microorganismo (Figura 1). Orégano, es una especia utilizada en la dieta mediterránea y en medicina popular como antioxidante, antiinflamatorio y antimicrobiano. Estudios previos realizados en nuestro laboratorio demostraron que el orégano presenta propiedades bactericidas y anti-adhesivas contra H. pylori.OBJETIVO: Evaluar la concentración, vía de administración y efecto inmunomodulador de extracto de orégano (EO) en macrófagos murinos (MO) no infectados e infectados con H. pylori.MATERIALES Y METODOS: Se empleó la cepa de referencia de H. pylori NCTC 11638 y concentraciones de 1 mg/ml, 5 mg/ml y 50 mg/ml de EO. Se utilizaron ratones BALB/c de 18 a 20 g de peso corporal. Lotes de 3 ratones fueron inoculados vía intragástrica (G) o intraperitoneal (I), 2 días consecutivos, con dos dosis de 250 μl de las diferentes concentraciones de EO. PBS se usó como control. Al tercer día se realizó sangrado submandibular para determinarhepato y nefrotoxicidad mediante medición de transaminasas y creatinina por métodos colorimétricos a partir del suero. Se extrajeron los MO peritoneales y se midió la actividad de fosfatasa acida tartrato resistente (TRAP) para determinar vía de administración y concentración optima del EO. Luego, lotes de 3 ratones fueron inoculados vía intragástrica con la concentración óptima (1mg/ml) de EO y se determinó actividad de arginasa en los MO peritoneales no infectados e infectados con H. pylori (relación 1 MO: 10 bacterias).RESULTADOS: No se observó diferencia significativa en los valores de transaminasas o creatinina a las concentraciones de EO probadas con respecto a los controles (Figura 2 y 3). Se obtuvieron valores más elevados de TRAP cuando se utilizó la vía de inoculación gástrica respecto a la intraperitoneal y se estableció la concentración de 1 mg/ml de EO como óptima (* p ≤ 0.05) (Figura 4). La actividad de arginasa en MO de ratones tratados con EO fue 1,8 veces menor con respecto a los controles (****p ≤ 0.001). La actividad de arginasa en MO tratados con EO e infectados con H. pylori fue 1,27 veces menor respecto al control (**p ≤ 0.04) y en MO tratados con EO sin estimulo con H. pylori fue 1,20 veces menor con respecto a los controles (***p ≤ 0.02) (Figura 5).Conclusiones: La inhibición de la actividad arginasa en MO infectados y no infectados con H. pylori es una condición que favorecería al MO frente a la infección permitiendo la eliminación del microorganismo. Este es el primer trabajo que demuestra el efecto inmunomodulador de EO lo que sugiere su potencial como una terapia alternativa de origen natural contra la infección por H. pylori.