Estudio de Fluorescencia intrinseca de Microcina J25

PLOPER, DIEGO; BELLOMIO, AUGUSTO; MORERO, ROBERTO

San Miguel de Tucuman

Jornada; 1º Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores Augusto Palavecino; 2000

Universidad Nacional de Tucuman

Microcina J25 es un peptido antibiótico cíclico de masa molecular 2017 Da, producido por una cepa de Escherichia coli y activo contra bacterias muy relacionadas filogenéticamente. Posee 2 residuos de tirosina y no posee triptofano, por lo que puede ser clasificada según Cowgill como una proteína clase A, cuya fluorescencia intrínseca es debida solo a los residuos de tirosina. El rendimiento cuántico de los residuos tirosilo es extremadamente sensible al micro-ambiente y a los grupos estructurales que los rodean. Esta propiedad es una herramienta importante para el establecimiento de hipótesis estructurales del peptido mismo y para el estudio de su inserción con otras biomoleculas. En el presente trabajo estudiamos la influencia del pH sobre la emisión y excitación de fluorescencia de microcina usando un espectrofluorometro SLM 4800. En soluciones alcalinas, pH > 9, el grupo fenolico se ioniza con la consecuente perdida de la fluorescencia, excepto por una muy pobre emision a 345 nm del anion tirosinato. Tambien se estudio el quenching de la fluorescencia intrínseca con yoduro de la microcina nativa en comparación a microcina desnaturalizada con urea.