Mapping and identification of antifungal peptides in putative defensins of flowers of the thistle Silybum marianum

AGUSTINA FERNÁNDEZ; MARIA LAURA COLOMBO; FANNY GUZMÁN; LAURA SUSANA BAKÁS; ISMAEL MALBRÁN; SANDRA ELIZABETH VAIRO CAVALLI

Córdoba

Congreso; XXXII Reunión Argentina / XVI Congreso Latinoamericano de FISIOLOGÍA VEGETAL; 2018

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

Lasdefensinas vegetales comparten una estructura α/β estabilizada por cisteína(CSα/β) aunque sus secuencias son muy diversas. A partir de las defensinas DefSm1Dy DefSm2 delcardo Silybum marianum diseñamosen forma racional potenciales péptidos antimicrobianos a fin de identificarmotivos antifúngicos putativos. A partir de alineamientos múltiples condefensinas de las que se ha reportado la existencia de regiones importantes parala actividad antimicrobiana, de la ubicación de estos en los modelostridimensionales de DefSm1D y DefSm2 previamente obtenidos y de péptidosgenerados a través de la base de datos C-PAMP a partir de secuencias dedefensinas homólogas, se eligieron los péptidos con mayor score que abarcabanel motivo gama-core (GXCX3-9C) y alfa-core (GXCX3?5C) que podrían contener aminoácidos esenciales para la actividadantimicrobiana funcionando como factores de especificidad. Los péptidosdiseñados se prepararon por síntesis química en fase sólida utilizando laestrategia Fmoc, se purificaron y analizaron por HPLC-RP y MALDI-TOF-MS. Laactividad antifúngica de los péptidos se determinó en microplaca sobre especiesde Fusarium en medio PDB 1/2conteniendo cloranfenicol con monitoreo de la densidad óptica a 595 nm. Lospéptidos derivados del alfa-core de DefSm2inhibieron el crecimiento de F.graminearum y de F. oxisporum.