Estudio de péptidos derivados de motivos estructurales de la defensina DefSm2-D de flores de Silybum marianum con acción sobre Fusarium graminearum: permeabilización de la membrana de conidios y efecto sobre su ultraestructura celular

AGUSTINA FERNÁNDEZ; ISMAEL MALBRÁN; FANNY GUZMÁN; LAURA SUSANA BAKÁS; SANDRA ELIZABETH VAIRO CAVALLI

Valparaíso

Workshop; III Workshop Péptidos terapéuticos para Bio-aplicaciones; 2019

Laboratorio de Síntesis de Péptidos del Núcleo de Biotecnología Curauma de la Pontificia Universidad Católica de Valparaíso

Las defensinas vegetales presentan dos regiones muy conservadas : el -core (GXCX3-9C) y el α-core (GXCX3?5C). Diseñamos péptidos antifúngicos putativos a partir de la secuencia de una defensina de flores de Silybum marianum llamada DefSm2-D y evaluamos su actividad frente al fitopatógeno Fusarium graminearum.Los péptidos se sintetizaron en fase sólida utilizando la estrategia Fmoc, se purificaron y analizaron por HPLC-RP en columna C18 (gradiente de acetonitrilo de 0-70% conteniendo 0,05% TFA). La masa molecular fue determinada por ESI-MS. Se evaluó la acción de los péptidos sobre las curvas de crecimiento de F. graminearum en ½ PDB en microplaca (595 nm) y se estableció la concentración inhibitoria mínima (CIM). Se evaluó el tiempo necesario para que los péptidos más activos produzcan muerte celular; por microscopía de fluorescencia, la capacidad permeabilizadora de membrana y por microscopía Electrónica de Transmisión (TEM) el efecto sobre la ultraestructura. Todos los ensayos se realizaron a la CIM.Se sintetizaron dos péptidos correspondientes a la región α-core (SmAPα1-21, SmAPα10-21) y dos al -core (SmAPg27-44, SmAPg29-34). SmAPα1-21, SmAPα10-21, y SmAPg27-44 presentaron CIM de 32, 70 y 20 μM, respectivamente. Los tres péptidos produjeron captación de ioduro de propidio. SmAPg27-44 presentó actividad fungicida (