Producción de CGTasa de Bacillus circulans DF9R: optimización del medio mediante un diseño factorial.

ADRIANA ROSSO, NATALIA SZERMAN, LORENA CAGNONE, SUSANA FERRAROTTI Y NORBERTO KRYMKIEWICZ.

Mendoza, Argentina

Congreso; SAIB XXXV; 1999

Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular

La Ciclodextrina Glucosiltransferasa (CGTasa) es una enzima producida por bacterias del género Bacillus que cataliza la transformación de almidón en ciclodextrinas. Con este fin se la emplea, en la industria. La producción de CGTasa de Bacillus circulan, DF 9R fue optimizada usando un diseño estadístico experimental con dos variables, en tres niveles. Las variables fueron la concentración de almidón, como fuente de carbono y de sulfato de amonio, como fuente de nitrógeno. Los cultivos se incubaron en Erlenmeyers a 37°C y 100 rpm durante 72 horas. Se utilizó un medio minimo salino, con extracto de papa 2 % y fosfato de potas¡o 0.1 M pH 7,6 con agregado de diferentes concentraciones de almidón de mandioca y sulfato de amonio según el plan factorial. La producción de enzima se midió por disminución de la absorbancia del complejo almidón-yodo, (previamente se demostró que la cepa en estudio no produce ninguna otra enzima con actividad amilolítica). Los datos obtenidos fueron ajustados con el programa Statgraphics Plus Statistical Graphics System mediante el siguiente polinomio: Y= bo+b1x1+b2x2+b11x12+b22x22+b12x1x2 La determinación de los coeficientes significativos del polinomio indica un efecto en la interacción lineal de las variables. El analisis de la superficie de respuesta muestra que el incremento conjunto de la concentración de sulfato de amonio y del almidón de mandioca tiene un efecto positivo en la actividad de la enzima.