CAMBIOS DE FALSO Y NO-SENTIDO DEL GEN DEL FACTOR VIII EN HEMOFÍLICOS A SEVEROS: 6 NUEVAS MUTACIONES.

ROSSETTI LC, RADIC P, LARRIPA IB, DE BRASI CD.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; XLIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Hemofilia A (HA) es una coagulopatía hereditaria ligada al sexo, originada por defectos en el gen factor VIII (F8). Además de las inversiones y las grandes deleciones causales de la mayoría de las HA severas (HAs), es importante la detección de mutaciones pequeñas, responsables de los restantes defectos moleculares. Los objetivos de este trabajo fueron identificar y analizar las mutaciones missense y nonsense en familias Argentinas con HAs. Se detectó la presencia de pequeñas mutaciones en un grupo de 65 familias con HAs, por la técnica de Conformation Sensitive Gel Electrophoresis  (CSGE) y se estudiaron mediante esta misma técnica 80 cromosomas X de individuos sanos de la población Argentina. Mediante el programa nnpredict se analizaron los posibles cambios en la estructura secundaria asociada al F8 mutado. En 9 familias se caracterizaron mutaciones puntuales: 4 nonsense, que determinan la terminación prematura de la traducción y el fenotipo severo, 2 reportadas c.6496T>A (p.2166R>X), c.2443C>T (p.815Q>X), y 2 no reportadas, c.6825T>A (p.2275Y>X), c.1656C>A (p.552Y>X); 5 missense que afectaron aminoácidos conservados entre las 4 especies analizadas (humano, porcino, murino y canino), 1 reportada c.6683G>A (p2228R>Q), y 4 no reportadas, c.6959T>C (p.2320L>S), c.755C>A (p.252T>K), c.6947T>C (p2316L>P), y c.5881T>A (p.1961W>R). En los 80 cromosomas X normales analizados se confirmó la ausencia de estas mutaciones. Mediante el estudio molecular exhaustivo del F8 se lograron caracterizar las mutaciones de cambio de base en 9 familias con HAs, el estudio de la población normal y el análisis bioinformático permitió determinar fehacientemente que las 4 mutaciones missense no reportadas, son causales de la HAs en cada caso. La caracterización de la mutación causal permite el asesoramiento genético de las familias afectadas, y la provisión de información clave para el tratamiento y seguimiento de la enfermedad.