ANÁLISIS DE MUTACIONES CAUSALES DE HEMOFILIA B EN ARGENTINA. TRANSICIONES ASOCIADAS A CAMBIOS DE FALSO Y NO SENTIDO

RADIC P, ROSSETTI L, LARRIPA I, DE BRASI C

Trelew, Argentina.

Congreso; XXXIV Congreso de la Sociedad Argentina de Genética (SAG); 2005

Sociedad Argentina de Genética

La hemofilia B (HB) es una enfermedad hemorrágica hereditaria ligada al cromosoma X causada por defectos en el gen del factor IX de coagulación que afecta a 1 de cada 30000 varones. Este trabajo presenta un algoritmo de análisis molecular para investigación de mutaciones causales de HB en Argentina. Muestras de DNA genómico extraído de leucocitos de pacientes con HB en distinta severidad, se amplificaron por PCR estándar obteniéndose 12 amplímeros que representan la región codificante y los consensos de splicing; y sometidos a análisis de heterodúplex por CSGE (conformation sensitive gel electrophoresis) de alta resolución. Los amplímeros anómalos fueron sometidos a secuenciación directa por el método manual-radioactivo. Se observaron 4 mutaciones asociadas a transiciones provocando cambios de falso y no-sentido en HB esporádicas, 3 de las cuáles no presentaban desarrollo de inhibidor. Caso 1: HB leve (5<FIX:C<25%), con una mutación de falso sentido en el exón H, dominio catalítico serín-proteasa, c.1136G>A p.333Arg>Gln. Caso 2: HB severa (FIX:C<1%) presentó una mutación de no-sentido en el exón B, dominio Gla (g-carboxi-Glutámico), c.223C>T p.29Arg>Stop. Estas mutaciones afectan dinucleótidos CpG. Caso 3: HB severa con una mutación de falso sentido en el exón G, dominio catalítico, c.761G>A p.208Gly>Asp. Caso 4: HB severa con inhibidor presentó una mutación de no-sentido en el exón F, dominio catalítico, c.720G>A p.194Trp>Stop. El esquema de análisis del gen del factor IX presentado, permite la caracterización especifica de la mutación causal de HB proveyendo información segura para el asesoramiento genético de familias afectadas en la Argentina.