INACTIVACIÓN DEL CROMOSOMA X MEDIANTE EL SISTEMA HUMARA: 2 PORTADORAS SINTOMÁTICAS DE HEMOFILIA A (HA) PRESENTAN SESGO COMPLETO.

RADIC P, L ROSSETTI, I LARRIPA, C DE BRASI.

Pergamino. Argentina

Congreso; XXXVI Congreso de la Sociedad Argentina de Genética (SAG); 2007

Sociedad Argentina de Genética (SAG)

La HA es una coagulopatía hereditaria asociada a defectos del FVIII con una frecuencia de 1:5000 varones. Actividades del FVIII:C<1% indican HA-severa. La hemofilia es trasmitida por mujeres quienes debido a su condición de heterocigotas, son normalmente portadoras asintomáticas. En desordenes recesivos ligados al X, el fenotipo sintomático en mujeres es inusual y puede resultar de: doble/hetero-homo-hemicigocidad del locus afectado o sesgo en la inactivación del cromosoma-X en heterocigotas. Portadoras no-sintomáticas presentan FVIII:C promedio del 50%. Objetivos: ajustar y validar el sistema HUMARA (Human Androgen Receptor) para análisis de sesgo en la inactivación del cromosoma-X y aplicarlo en mujeres portadoras sintomáticas de HA. La técnica consiste en: restricción del DNA-genómico con HpaII (sensible a metilación), análisis del STR-HUMARA [CAG]n por PCR-touchdown (un primer 5’-32P) en geles desnaturalizantes de poliacrilamida de alta resolución y radioautografía. Fueron estudiados 7 casos de portadoras de HA con valores de FVIII:C entre <1% y 40%. Los 7 casos resultaron heterocigotas para el sistema HUMARA (alelos: 260-310 bp). El análisis de inactivación del cromosoma-X indicó 2 casos con sesgo completo (100% desaparición de un alelo-HUMARA) asociado al fenotipo de HA-severa y valores FVIII:C de: <1% y 1,5%. Estos resultados permiten explicar la causa del fenotipo sintomático en estas portadoras de HA, que como heterocigotas para una mutación del FVIII no deberían presentar HA. Asimismo, concluimos que este sistema de análisis de sesgo en la inactivación del cromosoma-X es una herramienta útil para ser incorporada en los laboratorios de genética molecular de enfermedades recesivas ligadas al sexo.