OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE UNA NUEVA VARIANTE DE ERITROPOYETINA HUMANA RECOMBINANTE CON ACTIVIDAD NEUROPROTECTORA IN VITRO

MATTIO, M; CEAGLIO, N; AMADEO, I; PEROTTI, N; OGGERO, M; KRATJE, R; ETCHEVERRIGARAY, M

Mar del Plata (Buenos Aires, Argentina)

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) ? LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica; Sociedad Argentina de Inmunología

La eritropoyetina humana recombinante (rhEPO) es un factor de crecimiento hematopoyético utilizado en el tratamiento de anemias causadas por insuficiencia renal crónica o por quimioterapias. En los últimos años, ha sido propuesta para tratar anomalías del sistema nervioso debido a su rol antiapoptótico y neuroprotector. En este caso, su actividad eritropoyética puede producir efectos adversos como elevación de la masa de glóbulos rojos, hipertensión y fenómenos protrombóticos.El objetivo del presente trabajo es la obtención y caracterización de una nueva combinación de glicoisoformas de EPO, a la que denominamos neuroepoetin (rhNEPO), que exhiba características neuroprotectoras y sin efectos indeseados.Dicha variante fue obtenida mediante una purificación alternativa de la EPO producida en células CHO, presentando una composición de isoformas de carácter más básico por isoelectroenfoque (rango de pI 4,2-6,1) y con menor contenido de ácido siálico (AS), determinado por el método del peryodato-resorcinol (6,9 moles AS/ mol de rhNEPO en comparación con 11,7 correspondientes a la rhEPO). Dichas características determinaron una menor actividad eritropoyética in vivo en ratones normocitémicos (6.200 UI/mg con respecto a 132.000UI/mg para la rhEPO). Además, ensayos in vitro en líneas celulares nerviosas PC-12 y SH‑SY5Y tratadas con 38 y 190 ng/ml de rhEPO y rhNEPO, 24 horas previas y durante la inducción de apoptosis mediante supresión de suero y factor de crecimiento neuronal (PC-12) o adición de estaurosporina (SH-SY5Y), mostraron un efecto protector estadísticamente significativo (p