ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE CÉLULAS ESTROMALES MESENQUIMALES EN EL MICROAMBIENTE DE LAS METÁSTASIS HEPÁTICAS DE CÁNCER DE COLON EXPERIMENTAL.

SOFIA GOMEZ BUSTILLO; ESTEBAN FIORE; MARCELO MAXIMILIANO RODRIGUEZ; ESTANISLAO PEIXOTO; CATALINA ATORRASAGASTI; MARIANA MALVICINI; GUILLERMO MAZZOLINI; MARIANA GARCIA

Congreso; Congreso Argentino de Higado; 2015

Asociacion Argentina para el Estudio de las Enfermedades Hepaticas

Introducción: El carcinoma colorectal (CRC) es la tercer causa más frecuente de cáncer y las metástasis hepáticas estánpresentes en cerca del 1525%de los pacientes al momento del diagnóstico. El único tratamiento con intención curativaes la cirugía, que puede aplicarse a una minoría de pacientes. En la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas surge laterapia génica y celular. Las células estromales mesenquimales adultas (MSCs) son capaces de migrar hacia el ambientetumoral en respuesta a factores producidos por el tumor, convirtiéndolas en una herramienta muy valiosa para eltransporte de genes terapéuticos. Existen evidencias que indican que el comportamiento y funcionalidad de las MSCsdependerá del microambiente donde se encuentren. Objetivo: el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto delmicroambiente tumoral (modelo de metástasis hepáticas de cáncer de colon) sobre las MSCs, estudiando un ambienteconsiderado inmunosupresor y otro que demostramos previamente que favorece la respuesta antitumoral, generado porel tratamiento combinado de ciclofosfamida (Cy) y un adenovirus que expresa la citoquina inmunoestimuladora IL12(IL12).Materiales y métodos: se inocularon células de adenocarcinoma de colon murino CT26 (5 x105/animal) por víaintrahepática en ratones macho adultos Balb/c (día 0). Los animales se distribuyeron en 2 grupos (n=8/grupo): grupotratado con Cy (dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7) más AdIL12(dosis única, 109 PFU, i.v/24hs postCy)y grupo controlque no recibió el tratamiento. Se sacrificaron los animales 7 días después del tratamiento (día 14) y se tomaron muestrasdel tumor. Se dividió el tumor en fragmentos para aislar mRNA y evaluar la expresión de genes por qPCR y para generarmedios condicionados (MC), incubando pequeños fragmentos de este tumor en medio de cultivo durante 24 horas. LosMC fueron utilizados para evaluar la migración in vitro sobre las MSCs de ratón y para estimular a las MSCs y luegoevaluar la expresión de genes por qPCR en las MSCs. Resultados: Se observó que ambos MC fueron capaces de inducirla migración in vitro de las MSCs. La evaluación de los genes expresados en el tumor indicó que el microambientetumoral proveniente de los tumores tratados (TT) presentó menores niveles de VEGF, IL6y HIF1y mayores niveles IP10que los tumores control (TC), indicando que ambos microambientes tumorales presentaron diferentes características deexpresión génica. Por otro lado, la incubación con el MC de los TT indujo la expresión de IL8e IP10y disminuyó laexpresión de IL6en las MSCs en comparación con los MC de los TC, corroborando la hipótesis que el microambientetumoral puede condicionar el comportamiento de las MSCs. Conclusiones: Los factores producidos por el mediocondicionado del TT indujo un fenotipo sobre las MSCs que condicionaria una mejor respuesta antitumoral. Estosresultados nos permitirán seguir estudiando a las MSCs como posibles coadyuvantesdel tratamiento, especialmente encombinación con la Cy e IL12.