APLICACION DE CÉLULAS ÉSTROMALES MULTIPOTENTES DE MEDULA OSEA EN UN MODELO MURINO DE FIBROSIS HEPATICA

AQUINO JB1, FIORE EJ1, MALVICINI M1, MAGGINI J3, BAYO J1, PICCIONI F1, GARCÍA MG1, BOLONTRADE M3, LÓPEZ MV2, ATORRASAGASTI C1, ALANIZ L1, GEFFNER J2, PODHAJCER O3, MAZZOLINI GUILLERMO1

Congreso; Congreso Argentino de Hepatologia 2011; 2011

Sociedad Argentina de Gastroenterologia

INTRODUCCIÓN: La cirrosis es la primera causa de trasplante hepático en la Argentina y, a excepción de este procedimiento, no existe en la actualidad un tratamiento eficaz para esta enfermedad. Las células estromales multipotentes (MSCs) tienen un especial interés por su potencial utilización en estrategias de terapia celular para el tratamiento de la fibrosis/cirrosis hepática. Estas células tienen la capacidad de migrar hacia los sitios de lesión y podrían ejercer efectos anti-fibrogénicos. OBJETIVOS: Evaluar la capacidad migratoria, biodistribución in vivo y efecto terapéutico de las MSCs en un modelo de cirrosis experimental en ratones. MATERIALES Y MÉTODOS: Para generar el modelo de fibrosis hepática avanzada, se aplicó tioacetamida (TAA) en ratones C57Bl/6 (por vía intraperitoneal, 3 veces/semana, en dosis de 200mg/kg, durante 12 semanas). Las MSCs se obtuvieron de médula ósea de ratones singénicos y de ratones transgénicos para la proteína verde GFP y fueron caracterizadas por citometría de flujo y tests de diferenciación hacia osteoblastos, adipoblastos y condroblastos. Antes de su administración intravenosa, las MSCs fueron marcadas con los colorantes CM-DiI, DiR, Hoechst o transducidas con un retrovirus codificante para el gen reportero venus para su visualización in vivo. Tras 7 o 14 días, los animales fueron sacrificados para su estudio. Se analizó la biodistribución in vivo de las células inyectadas de manera no invasiva, mediante bioluminómetro, y el grado de fibrosis hepática desarrollado mediante tinción con rojo sirio. RESULTADOS: Las cultivos obtenidos presentaron las propiedades características de MSCs. Mediante la utilización del bioluminómetro, a los 3 días post-administración pudo detectarse una mayor presencia de MSCs en el hígado en comparación con otros órganos/tejidos a las distintas sobrevidas analizadas (2 horas, y 1, 3 y 7 días). A los 7 días, las MSCs pudieron ser visualizadas por microscopía de fluorescencia. Sin embargo, a los 14 días no se encontró un número significativo de MSCs (marcadas previamente con CM-DiI, Hoechst, o transducidas con el retrovirus reportero) en el tejido hepático. Además, se observó un menor grado de fibrosis hepática en los animales que recibieron MSCs en comparación con los tratados con vehículo (p