ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO DE PUNTOS DE RUPTURA DE UNA VARIANTE ESTRUCTURAL DEL *F8* ORIGINADA POR RECOMBINACIÓN NO-HOMÓLOGA CAUSAL DE HEMOFILIA A SEVERA.

WAISMAN K; ZIEGLER B; MARCHIONE VD; RADIC CP; ROSSETTI LC; ABELLEYRO MM

CABA

Congreso; 48vo CONGRESO ARGENTNO DE GENETICA; 2020

SAG

Aunque el 8-15% de las Hemofilias A severas (HAS)son causadas por grandes deleciones del F8, muypocas son caracterizadas y menos aún investigadaspara elucidar su mecanismo de origen. Aquí se abordanestos objetivos en un paciente con HAS usandométodos bioinformático-estadísticos originales,analizando motivos recombinogénicos en las rupturaspara elucidar su mecanismo molecular. Las regionesde incerteza 5 y 3? del rearreglo fueron acotadas porinverse shifting-PCR y se diseñaron PCR directas parasecuenciar el punto de recombinación. En intervalosde 50 pb con centro en los puntos de ruptura seestudiaron motivos del ADN asociados a inestabilidadgenómica, evaluando su significancia estadísticacon hipótesis nulas estimadas por valores esperadosen puntos de ruptura artificiales aleatorios en Xq28(n=240) y en las frecuencias de bases. La deleciónNC_000023.11:g.154981972_154989056delinsG,mostró la inserción de una base sin microhomologías.En el extremo 3? se detectó la secuenciarecombinogénica Jurka, una estructura secundariade ADN estable y un elemento AluSx, y en 5?, unmotivo Murine parvovirus recombination hotspot. Estoshallazgos apoyan la participación de la maquinariade retrotransposición, estructuras secundarias ysecuencias recombinogénicas en la susceptibilidada sufrir rupturas localizadas e indican al sistema dereparación de extremos no homólogos (NHEJ) comoel mecanismo molecular más probable.