Relaciones Genotipo-Fenotipo en Hemofilia II: variantes genéticas en F11, CYP4V2, F2 y F5 y su influencia en el fenotipo del paciente con Hemofilia A

MARCHIONE VD; RADIC CP; ABELLEYRO MM; PRIMIANI L; NEME D; DE TEZANOS PINTO M; DE BRASI CD; ROSSETTI LC

CABA

Congreso; XIII Congreso Argentino de Hemostasia y Trombosis IV Curso Educacional de la ISTH; 2018

Sociedad Argentina de Hematología

Introducción: La Hemofilia A (HA), coagulopatía hereditaria ligada al X, se caracteriza por una reducida actividad del factor VIII de coagulación (FVIII:C) causada por mutaciones de-letéreas en el F8. La severidad del fenotipo clínico de la HA no siempre puede ser explicado por el genotipo del F8, y se discute si está influenciado por la coparticipación de mutaciones o variantes trombofílicas en F5 como FV Leiden (rs6025) o variantes del F2 (rs1799963) y SNPs en los genes F11 y CYP4V2 (miembro de la familia citocromo P450) entre otros.Recientemente se presentó evidencia que sugieren que mutaciones en F5 y F2 contribuyen al riesgo a desarrollar inhibidor en HA (INH), indicando la importancia del análisis de estas variantes para poder predecir la complicación más seria que puede afectar la terapia sustitutiva del paciente con Hemofilia.Objetivos: Estudiar marcadores genéticos (SNPs) asociados a riesgo trombofílico en los genes F2, F5, F11 y CYP4V2 y evaluar su posible impacto en el fenotipo del paciente con HA severa, estudiando, la mitigación de los síntomas de sangrado, su posible asociación con el desarrollo de INH en poblaciones estratificadas por genotipo del F8 (i.e, Inversión del intrón 22, INV22, causal del ≈42% de las HA severas) y edad del paciente.Métodos: Se estudiaron 79 muestras de ADN de pacientes con HA severa mediante el análi-sis de los SNPs: F2:c.*97G>A (rs1799963), F5:c.1601G>A p.Arg534Gln (Factor V Leiden, rs6025), y F5:c.1538G>A p.Arg513Lys (rs6020), F11:c.-2066A>T (rs3756008), y F11:c.56-282T>C (rs2036914) y CYP4V2:c.775C>A p.Gln259Lys (rs13146272) mediante la técnica de PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Las pruebas de hipótesis esta-dísticas sobre tablas de contingencia, incluyeron Chi-cuadrado con la corrección de Yates y Fisher-exacto usando el software GraphPad Prism 5.0. Asimismo se calcularon los odds ratio OR, asociados a cada alelo del sistema bialélico con su correspondiente intervalo de confianza del 95%. Resultados: En pacientes con HA severa e INV22, CYP4V2:c.775C>A p.Gln259Lys (SNP rs13146272) mostró un incremento marginalmente significativo de riesgo a desarrollar INH asociado al alelo [C] con un OR de 2,118 (1,11-4,06) (P=0,0340*) y un OR de 4,156 (1,487-11,61) (P=0,0060**) respecto al número de exposiciones al FVIII terapéutico recibidas por paciente (N<50) en el estrato etario 12-34 años.Conclusiones: Nuestros datos relativos a las diferencias en las frecuencias de CYP4V2:c.775C>A en pacientes con HA-severa son compatibles con la hipótesis del origen multifactorial tanto del desarrollo de INH como de la severidad del fenotipo clínico en nuestra población.