Advances in the Characterization of putative S-layer proteins of Lactobacillus kefir

DELFEDERICO L,; HOLLMAN A,; GARROTE G; ABRAHAM A.G; DE ANTONI, G; DI SALVO A; SEMORILE L

San Miguel de Tucumán

Simposio; Simposio Internacional de Biotecnología –II Simposio Argentino Italiano de Bacterias Lácticas.; 2004

Cerela -Proimi

En los últimos años se ha descripto en bacterias la presencia de arreglos regulares superficiales de naturaleza proteica.  Esta estructura cristalina (capa S), está  formada por subunidades de una única proteína o glicoproteína, de 40 a 200 kDa.El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de proteínas de capa S en Lactobacillus kefir JCM5818. La cepa se creció en caldo MRS en anaerobiosis a 30ºC durante 48 horas. Las bacterias se cosecharon por centrifugación a 10000 g durante 10 min y se lavaron 2 veces con buffer fosfato (pH 7). El pellet celular  obtenido, se estandardizó a DO 10 (600 nm) y la capa S se extrajo por  tratamiento con LiCl 5 M a 37ºC durante 60 min con agitación.Se determinó la capacidad de esta proteína de ensamblarse a liposomas y se determinó el potencial Z. Se observó que el potencial Z disminuye a medida que aumenta la concentración de proteínas recristalizadas sobre el liposoma.  Por otro lado la capa S se hidrolizó con TFA 2N y los residuos glicosidicos se analizaron por HPAEC-PAD donde se evidenció la presencia de galactosa entre otros azúcares.