REGULACIÓN DE LA HOMEOSTASIS DE Mg2+ EN Salmonella: ANÁLISIS DE LA REGIÓN PROMOTORA DE mgtA.

PONTEL LUCAS, SPINELLI SILVANA Y SONCINI FERNANDO

Rosario

Congreso; XXII Reunión Anual Sociedad de Biología de Rosario; 2002

Salmonella enterica serovar Typhimurium posee la capacidad de modular la distribución celular de Mg2+, de manera de lograr sobrevivir en ambientes carentes del catión, como por ejemplo dentro del fagolisosoma del macrófago, ambiente en el que sobrevive durante el proceso infeccioso.  Esta respuesta adaptativa está mediada por el sistema de regulación transcripcional PhoP/PhoQ, que monitorea la concentración de Mg2+ extrcelular y modula la expresión de los genes que codifican para los transportadores de Mg2+ de alta afinidad, MgtA y MgtCB. En el laboratorio se demostró previamente la existencia de un sistema independiente de PhoQ que responde a la concentración de Mg2+ intracelular y controla la transcripción de mgtA y mgtCB.  De esta forma la concentración del catión divalente se mantiene dentro de un rango preciso en el interior celular, asegurando el óptimo funcionamiento de los diversos procesos celulares. Durante este periodo hemos iniciado la caracterización de la región promotora de mgtA con el objeto de identificar el o los sitios blanco de esta regulación independiente de PhoQ.  El análisis de la expresión de diversas inserciones transcripcionales de lacZ localizadas a lo largo del locus mgtA indicó la existencia de una región responsiva a esta regulación corriente arriba del codón de iniciación de mgtA. Estos estudios se profundizaron mediante el análisis de transcriptos presentes en distintas condiciones de cultivo, utilizando la técnica de “Northern Blot”, y mediante el rastreo de factores proteicos que interaccionan con esta región, usando la técnica de retardo en geles de poliacrilamida de sondas de la región promotora.  Estos resultados nos han permitido acotar la región responsiva a esta regulación, de utilidad en la caracterización de la regulación de la homeostasis de Mg2+ intracelular en esta enterobacteria.