Caracterización de YLSCP2 en complejo con diferentes ligandos

BURGARDT, N. I.; PÉREZ DE BERTI, F. J.; FALOMIR-LOCKHART, L. J.; FERREYRA, R. G.; CÓRSICO, B.; CEOLÍN, M. R.; ERMÁCORA, M. R.

La Plata

Congreso; XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica (SAB); 2008

Sociedad Argentina de Biofìsica

Las proteínas de la familia de proteínas transportadoras de esteroles (SCP2) poseen un alto grado de conservación estructural y pueden unir una amplia variedad de ligandos hidrofóbicos. Esta plasticidad funcional parece ser necesaria para su actividad biológica, la cual todavía no está completamente esclarecida. La proteína transportadora de esteroles de la levadura Yarrowia Lipolytica (YLSCP2) presenta la habilidad de unir diversos ligandos [1] y podría resultar un modelo adecuado para el estudio in-vivo de la familia SCP2. El estudio de la unión de ligandos hidrofóbicos suele presentar algunas complicaciones debido a su baja solubilidad y su tendencia a formar micelas o liposomas. El uso de solventes para disolver estos ligandos podría afectar la estructura o estabilidad de la proteína. El efecto del etanol sobre la estructura de YLSCP2 se estudio mediante fluorescencia de triptofano y dicroísmo circular, demostrando que a concentraciones menores a 5% no se observan cambios significativos. Por otro lado, se observó que la interacción de YLSCP2 con membranas produce cambios en su estructura secundaria. El efecto de la unión de ligandos sobre YLSCP2 se estudió mediante desplazamiento de ácido cis-parinárico, dispersión de rayos-x en bajo ángulo, fluorescencia de triptofano y dicroísmo circular. Estos datos experimentales fueron analizados en conjunto con la estructura modelo obtenida para YLSCP2 mediante modelización por homología. Los resultados obtenidos muestran que cada tipo de ligando produce un efecto diferente sobre YLSCP2 y podrían indicar un mecanismo funcional diferencial para YLSCP2.