Detección de genes de resistencia a antibióticos y bacterias resistentes en compost de cama de pollo y en suelos abonados

RIZZO PEDRO F; HERNANDEZ GUIJARRO, KEREN; OKADA ELENA; PEREZ DEBORA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo; 2022

Asociación Argentina de la Ciencia del Suelo

Los residuos de la producción animal pueden contener residuos o trazas? de antibióticos, bacterias resistentes a antibióticos (BRAs) y genes de resistencia a antibióticos (GRAs). Estos contaminantes de preocupación emergente pueden ser incorporados al ambiente cuando los residuos son reutilizados como abono. En Argentina no existen estudios acerca de la ocurrencia de GRAs en compost y/o suelos abonados. Los objetivos de este trabajo fueron analizar la presencia de BRAs y GRAs en cama de pollo sin compostar (cruda) (CP) y cama de pollo compostada (compost), y evaluar a campo la presencia de GRAs en un suelo bajo producción hortícola luego de aplicar la CP y los composts. En principio, se realizó el compostaje de la cama de pollo durante 134 días con los siguientes métodos: C1) compostaje pasivo, sin aireación (C:N=19); C2) compostaje con aireación (C:N= 19); C3) compostaje con aireación y agregado de C (C:N=30). Luego al obtener las enmiendas, estas fueron empleadas en un ensayo a campo realizado sobre un lote del cinturón hortícola de Mar del Plata con historial de aplicación de cama de pollo sin compostar. El ensayo contó con los siguientes tratamientos (por triplicado): T1, suelo sin aplicación de enmienda; T2, T3 y T4 abonados con los composts C1, C2 y C3, respectivamente, y T5 abonado con cama de pollo sin compostar. Además, se analizó un suelo control sin historial de uso hortícola. A partir de las muestras de cama de pollo sin compostar y compostada se aislaron BRAs, específicamente a amoxicilina mediante el método de dilución en placa. Paralelamente se extrajeron los ADNs de las cepas aisladas, así como de las muestras de la cama de pollo sin compostar, los compost y del suelo y se amplificaron mediante PCR los siguientes GRAs: tetM (tetraciclina), ermB (eritromicina) y sul1 (sulfonamida). Se utilizaron los cebadores específicos de cada gen reportados en la literatura y se incluyeron controles positivos previamente secuenciados. Se aislaron bacterias resistentes a amoxicilina (provenientes de colonias morfológicamente diferentes), tanto en cama de pollo sin compostar (n=8), en C1 (n=5), C2 (n=3) y C3 (n=4). De las cepas aisladas, el 60% contenían al menos uno de los GRAs analizados. A partir del ADN extraído de cama de pollo sin compostar se detectó la presencia de todos los GRAs, mientras que, en los compost, no hubo amplificación de ninguno de los genes en estudio. Esto sugeriría que el compostaje de cama de pollo reduce pero no elimina totalmente la concentración de GRAs. A campo, se detectó la presencia de los GRAs en el suelo, tanto en las parcelas sin aplicación de enmienda (T1) como en las que se aplicó compost y CP (T2 a T5). En el suelo control (parque) solo se detectó el gen tetM en una de las réplicas. Los resultados obtenidos en este trabajo indican que la CP es una fuente de bacterias y genes de resistencia a antibióticos y su aplicación en el suelo como enmienda puede favorecer la proliferación de los mismos en el ambiente.