Potencial citotóxico del peróxido de hidrógeno en células epiteliales de riñón bovino

POO, J. I.; LOUGE URIARTE, E.L; POO, J.I; ESPINOZA VIDAL, E.; URTIZBIRIA, F.; GERPE, M; ESCORIZA M; PEREIRA, S; VERNA, A; ROMEO, F; GONZÁLEZ ALTAMIRANDA, E

Mar del Plata

Congreso; VIII Congreso Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2022

El peróxido de hidrógeno (H2O2) es una especie reactiva del oxígeno (ROS) por su alta capacidad oxidante. A bajas concentraciones actúa como segundo mensajero intracelular y a elevadas puede generar reacciones de oxidación, conduciendo a necrosis o apoptosis. La necrosis no es controlada e involucra la desagregación de cromatina, dilatación de organelas, pérdida de continuidad y lisis de la membrana celular. La apoptosis es un proceso activo del metabolismo celular que involucra condensación nuclear y citoplasmática. Sin embargo, se mantiene la integridad de la membrana nuclear y aparecen dilataciones globulares (blebs) que originan cuerpos apoptóticos. Un oxidante puede desencadenar apoptosis o necrosis dependiendo de la concentración y tiempo de exposición. El objetivo fue evaluar el efecto citotóxico del H2O2 en células epiteliales de riñón bovino (MDBK). Estas células se mantuvieron en suspensión y fueron expuestas a H2O2 en distintas concentraciones (22 mM, 44 mM y 88 mM) durante 12 y 24 h. El número de células apoptóticas (A) y necróticas (N) se determinó mediante la tinción con azul tripán (0,4 %, p/v) y visualización en cámara de Neubauer con microscopio óptico. Se calculó el índice relativo de apoptosis (IRA = promedio de células A en exposición / promedio de células A en control negativo). En todos los tratamientos se observó muerte celular y la misma fue dependiente de la concentración de H2O2 y del tiempo de exposición (p < 0,05). Las mayores proporciones (˃ 90%) de células A se observaron con 88mM de H2O2 a las 12 y 24 h de exposición. Sin embargo, en las tres concentraciones evaluadas se observaron células A y N, siendo la apoptosis más evidente a las 12 h (p < 0,05), mientras que a las 24 h los porcentajes entre ambos tipos celulares fueron similares (p > 0,05). El IRA aumentó de manera significativa (p < 0,05) a las 24 h de exposición (4,0; 3,2 y 1,1 para 88mM, 44mM y 22mM, respectivamente) con respecto a las 12 h (2,1; 1,8 y 1,4, para las concentraciones indicadas). Si bien no se evaluó el mecanismo de acción, diversos estudios han reportado el efecto citotóxico del H2O2 activando factores proapoptóticos y vías de señalización intracelular. Además, debido al comportamiento ROS del H2O2, la citotoxicidad observada podría estar mediada por estrés oxidativo, como fue demostrado para diversos tipos celulares en otras investigaciones. El presente estudio aporta la primera información del efecto citotóxico del H2O2 en las células MDBK.