Vacuna a péptidos contra la Fiebre Aftosa en bovinos. Estudios de protección y evaluación de inmunidad de mucosas

SORIA, IVANA; PEGA, JUAN FRANCO

Valle Hermoso, Córdoba

Jornada; XXII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología (SAV); 2012

Asociación Argentina de Microbiología (AAM)

Se ha encontrado como inmunógeno alternativo para la vacuna contra el Virus de la Fiebre Aftosa (VFA) actual un péptido sintético dendrimérico constituído por un epitope T [3A(21-35)] unido a cuatro copias de un epitope B [sitio A; VP1(136-154)] del serotipo C y serotipo O del VFA. Dichos péptidos B4T protegieron al 100% y al 75% de los cerdos vacunados respectivamente. Para este trabajo se sintetizaron los péptidos, B2T y B4T utilizando el epitope B del serotipo O (UK/01). Sabiendo que en bovinos los péptidos B2T y B4T indujeron respuesta humoral contra el VFA y contra el péptido B4T, se decidió evaluar la capacidad de inducir protección de los mismos frente al desafío viral. Se trabajó con 1 bovino control negativo y 5 animales que recibieron vacuna comercial como grupo control positivo. A los 42 dpv, en boxes de alta seguridad, se desafiaron a los animales con el VFA (dosis de 10000 DIRL50) por instilación nasal y se realizó un seguimiento clínico durante 7-8 días. Se midieron como parámetros de síntomas de la enfermedad, la temperatura rectal (1 punto si > a 39,5ºC), lesiones en boca y lengua (1 punto), aparición de vésiculas en patas (1 punto por cada pata lesionada) y se aplicó un score diario a cada animal siendo 6 el máximo puntaje. Los bovinos nro. 44 y 170 del grupo B2T y nro. 36 y 431 del grupo B4T retardaron la aparición de síntomas respecto al animal control. Este último presentó generalización podal a los 4 días post-infección, mientras que los bovinos 170 y 431 lo hicieron a los 7dpi y los bovinos 44 y 36, se encontraban parcialmente protegidos al no presentar patas lesionadas a lo largo de todo el seguimiento clínico. Todo los bovinos que recibieron la vacuna comercial resultaron protegidos frente al desafío. Se observó que aquellos animales (Bov nro. 168 y 166) con menor respuesta inmune celular y humoral pre-desafío fueron los que menor nivel de protección presentaron, mostrando una clínica severa y rápida. A los 7 días post-desafío se evaluó la inmunidad en mucosa. Para ello se extrajeron los linfonódulos: mandibular, retrofaríngeo medial y traqueo-bronquial. Se analizaron por ELISPOT células secretoras de anticuerpos (Acs) -VFA (IgA, IgM, IgG1 e IgG2) en los distintos tejidos linfoides. Se observó que aquellos animales que estaban parcialmente protegidos no presentaron células productoras de Acs en el linfonódulo traqueo-bronquial mientras que los animales con mayores síntomas y lesiones al igual que el bovino control negativo, presentaron > 40 células productoras de Acs (IgM) /106 células totales. En conclusión, los péptidos B2T y B4T no indujeron protección contra VFA en bovinos. Solo se pudo observar un retardo en el avance de la enfermedad y se encontro una relación entre el grado de avance y los resultados obtenidos para la inmunidad celular y humoral en los ensayos in vitro.