INDUCCIÓN DE RESPUESTAS INMUNES LOCALES EN EL TRACTO RESPIRATORIO DE BOVINOS INFECTADOS CON VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA

PEGA, JUAN FRANCO; BUCAFUSCO, DANILO; STAFFORINI, GUILLERMINA; PÉREZ-BEASCOECHEA, CLAUDIA; SCHAMMAS, JUAN MANUEL; DI GIACOMO, SEBASTIÁN; MARADEI, EDUARDO; RODRÍGUEZ, LUIS; BORCA, MANUEL VÍCTOR; PÉREZ FILGUEIRA, MARIANO

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Asociación Argentina de Microbiología (AAM)

Introducción: Los anticuerpos neutralizantes inducidos en el bovino luego de la infección con el virus de la Fiebre Aftosa (VFA) son fundamentales para la eliminación del virus, y los niveles de los mismos en la región orofaríngea y en plasma se correlacionan con protección frente a posteriores reinfecciones. A pesar de la importancia de este hecho no existen a la fecha reportes acerca de los mecanismos inmunitarios adaptativos a nivel local luego de la infección con el VFA en el bovino. Objetivo: Dilucidar el armado de la respuesta inmune adaptativa inducida en el bovino, durante los eventos que tienen lugar tempranamente luego de la infección por VFA. Metodología: Se infectaron 12 bovinos Hereford (aprox. 300 kg) seronegativos para el VFA. Para ello, los animales fueron alojados en boxes con nivel de contención biológica BSL-3A del CICVyA-INTA, donde se efectuaron las inoculaciones experimentales. Las descargas se efectuaron con 2 ml por animal de VFA O1Campos (10*7 BTID50/ml) por vía oronasal mediante un modelo de aerosol controlado, a fin de recrear las condiciones de una infección natural por vía oronasal. Diariamente se tomaron muestras de suero de todos los bovinos desde el desafío viral hasta su eutanasia. Los animales fueron sacrificados entre los 2 y 6 días post-infección (dpi), y de cada uno de ellos se extrajeron postmortem tejidos linfoides de mucosas del tracto respiratorio con el objeto de detectar células secretoras de anticuerpos (ASC) específicas para el VFA, empleando un ELISPOT para isotipos (IgA, IgM, IgG1 e IgG2) desarrollado en nuestro laboratorio. Las estructuras anatómicas analizadas comprendieron: linfonódulos mandibulares, linfonódulos retrofaríngeos mediales y laterales, tonsila faríngea, linfonódulo traqueobronquial y bazo. Los anticuerpos séricos contra el virus fueron determinados por medio de un ELISA de bloqueo en fase líquida (lpELISA), y la capacidad neutralizante de los mismos fue evaluada mediante un ensayo de índice seroneutralizante optimizado para tal fin. Resultados: A partir del 4to dpi se detectaron ASC a nivel local en tejidos linfoides de mucosas, cuyo número se hizo máximo al 6to dpi, mientras que la seroconversión medida por lpELISA ocurrió entre el 4to y 5to dpi, coincidiendo con la dinámica observada mediante el ensayo de índice seroneutralizante y con la manifestación de signos clínicos típicos de Fiebre Aftosa. Los perfiles isotípicos correspondieron con una respuesta primaria (IgMIgG1IgAIgG2). Se observó un breve lapso temporal entre la inducción de inmunidad local en mucosas y la aparición de respuestas sistémicas. Conclusiones: Este trabajo permite caracterizar, por primera vez, la respuesta inmune humoral temprana que se induce en el tracto respiratorio de bovinos seronegativos luego de su infección con VFA, en cuanto a curso temporal, magnitud y perfil isotópico de las inmunoglobulinas evocadas. Las respuestas locales contra el VFA hasta el 6 dpi llegaron al 0,4% del total de células total y a pesar de la dominancia del isotipo IgM (propio de una respuesta primaria) se detectó un temprano switch a IgG1, característica propia de las respuestas T-independientes de tipo II.